人小肠上皮细胞；FHs74Int 新品

                                                          人小肠上皮细胞；FHs74Int
产品信息：

来源与背景

FHs 74 Int细胞系源自妊娠3-4个月人胚胎的小肠组织，属有限细胞系（非永生化），具有正常二倍体核型。该细胞系PAS染色阴性，免疫过氧化物酶染色显示角蛋白阴性，适用于肠道屏障功能及毒性研究。

 形态与生长

形态：上皮细胞样，贴壁生长。

倍增时间：约96-168小时（4-7天），传代比例推荐1:3至1:4。

鉴定与质量控制

支原体检测：各供应商均声明阴性。

培养操作指南

培养条件

基础培养基  DMEM（高糖）

添加剂  10%胎牛血清（FBS）、10 μg/mL胰岛素、1%双抗（青霉素/链霉素）

培养环境  37℃、5% CO?、饱和湿度

传代比例  1:3至1:4（汇合度80%-90%时传代）

冻存条件  55%基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO，液氮保存

操作步骤

复苏

37℃水浴快速解冻，转移至含6 mL完全培养基的离心管，1200 rpm离心3 min。

弃上清，细胞沉淀用完全培养基重悬，接种至T25瓶，培养箱静置2-4小时后观察。

传代

PBS清洗后，加入1 mL 0.25%胰酶消化60-90秒，显微镜下观察细胞变圆即终止。

完全培养基终止消化，离心（1200 rpm，3 min）后重悬分瓶。

冻存

对数期细胞离心后，用预冷冻存液重悬（密度≥1×10? cells/mL），程序降温保存。

三、关键注意事项

胰岛素依赖

培养基中必须添加胰岛素（10 μg/mL），否则细胞贴壁及增殖显著受抑。

消化控制

胰酶消化时间需严格监控（60-90秒），过度消化会导致细胞损伤。

代次限制

作为有限细胞系，建议在5-8代内完成实验，避免老化影响结果。

污染防控

收到细胞后需立即检查污染，48小时内反馈问题可申请重发。

四、应用场景与局限性

研究用途：

肠道屏障模型：研究营养吸收、药物转运及病原体互作。

毒性评估：食品/药物对小肠上皮的毒性筛选。

局限性：

倍增时间长，实验周期需合理规划。

仅限科研使用，不可用于临床或诊断。

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注意事项与应用

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。