人外周血淋巴细胞；CCRF-SB

                                                          人外周血淋巴细胞；CCRF-SB
产品信息：

来源与背景

CCRF-SB细胞系源自人外周血淋巴母细胞，属于B淋巴细胞谱系，表达典型淋巴细胞标志物（如CD19、CD20）。该细胞系由ATCC保藏，广泛用于免疫学及肿瘤学研究。

生长与形态

生长特性：悬浮生长，常聚集成团，增殖速度较快。

倍增时间：约24-48小时，需定期传代维持密度。

鉴定与质量控制

STR分型：特征位点包括Amelogenin X, CSF1PO 11/12, D2S1338 24/25等。

污染检测：支原体、细菌、真菌及HIV-1/HBV/HCV均为阴性。

培养操作指南

培养条件

基础培养基  RPMI-1640（含NaHCO? 1.5 g/L，丙酮酸钠 0.11 g/L）

血清添加  10%-20%胎牛血清（FBS）

添加剂  1%双抗（青霉素/链霉素）

培养环境  37℃、5% CO?、湿度70%-80%

传代比例  1:2至1:5（推荐1:3）

冻存条件  90%完全培养基 + 10% DMSO，程序降温后液氮保存

操作步骤

复苏

37℃水浴快速解冻冻存管，转移至含4-6 mL完全培养基的离心管，1000 rpm离心5 min。

弃上清，细胞沉淀用完全培养基重悬，接种至T25瓶或10 cm培养皿。

传代

悬浮细胞：直接离心收集细胞（1000 rpm，5 min），弃上清后重悬分瓶。

半量换液法：弃半数培养基，补加新鲜培养基并混匀后分瓶。

冻存

对数期细胞离心后，用冻存液重悬（密度≥1×10? cells/mL），程序降温至-80℃后转入液氮。

关键注意事项

细胞状态维护

密度监控：密度过高（>1×10? cells/mL）易导致营养耗竭，需及时传代。

聚团处理：吹打时需轻柔，避免机械损伤（可使用宽口移液管）。

污染与安全

生物安全等级为1级，但操作仍需在生物安全柜中进行。

收到细胞后立即用75%酒精消毒管壁，检查细胞形态及污染情况。

特殊现象

空泡形成：高密度培养时细胞内可能出现空泡，属正常特性。

贴壁变体：部分亚群可能贴壁生长，需调整消化时间（≤2分钟）。

研究用途：

免疫学研究：淋巴细胞信号通路及细胞因子调控机制。

药物筛选：化疗药物（如阿霉素）对淋巴细胞的毒性评估。

肿瘤免疫学：肿瘤微环境与免疫细胞互作模型。

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注意事项与应用

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。