WI-38VA-13subline2RA：WI38VA13subline2RA 新品

                                                          人胚肺细胞VA13细胞；WI-38VA-13subline2RA
产品信息：

来源与背景

衍生于正常人胚肺成纤维细胞系 WI-38，经 SV40 病毒低滴度感染后，通过连续传代和克隆筛选获得亚系 2RA。

含 SV40 大 T 抗原（neo 基因），突破了 WI-38 的有限寿命限制，可无限增殖。

物种来源：人（女性胚胎）

组织来源：肺成纤维细胞

生物安全等级：BSL-2。

倍增时间：约 24-48 小时（具体因培养条件而异）。

关键功能特性

表达 SV40 大 T 抗原，适用于病毒学、肿瘤转化及衰老机制研究。

可用于药物毒性测试、基因转染实验及细胞永生化机制研究。

二、培养操作流程

培养基与试剂

基础培养基：MEM-EBSS（Minimum Essential Medium with Earle's Balanced Salts）。

添加成分：

10% 胎牛血清（FBS）

1% 青霉素-链霉素（P/S）。

消化液：0.25% 胰蛋白酶-0.53 mM EDTA。

冻存液：

92% FBS + 8% DMSO（程序性冻存）

或 55% 培养基 + 40% FBS + 5% DMSO。

传代培养（贴壁细胞）

消化：

弃旧培养基，PBS 洗涤 1-2 次。

加入胰酶（T25 瓶 1-2 mL），37℃ 消化 1-3 分钟，镜下观察细胞变圆脱落。

终止与离心：

加入 2 倍体积完全培养基终止消化，吹打均匀。

1000 rpm 离心 5 分钟，弃上清。

重悬与分瓶：

用 1-2 mL 完全培养基重悬，按 1:2 至 1:4 比例 分瓶（如 T25 分至 2 瓶）。

补充新鲜培养基至 5-8 mL/瓶，37℃、5% CO? 培养箱培养。

冻存与复苏

冻存：

细胞状态良好时冻存（建议 3 代内）。

程序性冻存：细胞悬液 → 冻存盒 → -80℃ 过夜 → 液氮保存。

复苏：

37℃ 水浴快速解冻，转移至含 5 mL 完全培养基的离心管。

1000 rpm 离心 5 分钟，重悬后接种至培养瓶，次日换液。

三、关键注意事项

细胞状态监控

收到细胞后需拍照记录（40×, 100×, 200×），作为售后依据。

前 3 天避免扰动，静置 3-4 小时后再观察。

污染防控

支原体检测为阴性（部分供应商）。

操作全程无菌，培养箱定期消毒。

特殊处理

贴壁弱细胞：运输中易脱落，需离心收集上清液，胰酶轻柔消化。

传代比例：避免过度稀释，推荐 1:2～1:4。

四、应用与保存

应用场景：

病毒宿主细胞（如 SV40 研究）、细胞衰老模型、毒性筛选。

STR 鉴定：

供应商提供 STR 鉴定报告，确保细胞系可靠性。

公司正在出售的产品：

注意事项与应用

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。