PK-1人胰腺导管腺癌细胞 新品

商品属性

种属来源：人

组织来源：胰腺导管腺癌

细胞类型：贴壁生长

生物安全等级：BSL-1（需在二级生物安全柜中操作）

保藏机构编号：JCRB Cell Bank IFO50321 / ECACC 94092053

关键特性

背景：源自68岁日本男性胰腺导管腺癌患者手术样本（1985年建系）。

形态：上皮细胞样，贴壁生长，可形成不规则岛状或腺样结构。

肿瘤标志物：表达CK7、CA19-9，低表达CEA。

基因特征：携带KRAS突变（常见于胰腺癌），TP53缺失。

致瘤性：在裸鼠体内可形成转移性肿瘤。

培养条件与试剂

| 项目 | 要求 |

| 基础培养基 | RPMI-1640 |

| 补充剂 | 10% 胎牛血清（FBS） |

| 生长添加剂 | 1% 非必需氨基酸（NEAA） |

| | 1% 青霉素-链霉素（100 U/mL）|

| 培养环境 | 37°C，5% CO₂，饱和湿度 |

| 传代周期 | 每3-4天（80-90%密度时） |

操作流程

复苏步骤

迅速解冻细胞（37°C水浴≤1分钟）；

转移至含5mL培养基的离心管，1000 rpm离心5分钟；

弃上清，重悬细胞接种于T25培养瓶。

传代步骤

弃培养基，PBS洗涤1次；

加入0.25%胰酶-EDTA，37°C消化1-3分钟；

加入含血清培养基终止消化，吹打成单细胞悬液；

按1:3~1:5比例接种新瓶（建议密度≥5×10⁴ cells/cm²）。

冻存步骤

消化收集细胞，离心后重悬于冻存液（90% FBS + 10% DMSO）；

分装至冻存管（密度5-10×10⁶ cells/mL）；

程序降温：4°C（30min）→ -80°C（24h）→ 液氮长期保存。

质量控制

无菌检测：支原体、细菌、真菌阴性（PCR/MYC检）。

STR鉴定：定期验证人源特异性（数据库比对确认）。

增殖稳定性：连续传代后维持典型形态及生长曲线（倍增时间≈30小时）。

注意事项

关键提示：

避免过度消化（胰酶暴露时间≤3分钟）；

血清批次需预先测试支持生长能力；

冻存后复苏存活率通常为70-85%，建议使用专用复苏培养基。

应用领域

胰腺癌转移机制研究

化疗药物敏感性筛选（如吉西他滨耐药模型）

靶向治疗（如KRAS抑制剂）体外评价

公司正在出售的产品