PF-382人白血病细胞 新品

商品属性

| 组织来源 | 人类外周血（急性T淋巴细胞白血病，T-ALL） |

| 细胞类型 | 悬浮生长型淋巴细胞 |

| 疾病背景 | 来源于复发难治性T细胞急性淋巴细胞白血病（T-ALL）患者 |

| 生物安全等级 | BSL-1 (常规实验室操作，需遵守细胞培养通用安全规范) |

| 保藏机构 | DSMZ (德国微生物菌种保藏中心，编号 ACC 758) / ECACC 等 |

| 推荐用途 | 白血病发病机制研究、药物筛选（尤其化疗耐药性研究）、肿瘤免疫学模型 |

培养条件

| 项目 | 要求 |

| 基础培养基 | RPMI-1640 (含 Glutamax 更佳) |

| 血清添加 | 10% 胎牛血清 (FBS) (热灭活非必需) |

| 生长添加剂 | 1% 非必需氨基酸 (NEAA), 1mM 丙酮酸钠 (可选) |

| 细胞因子 | 依赖重组人 IL-2 (10–20 U/mL) 维持增殖活性 (关键！) |

| 培养环境 | 37°C, 5% CO₂, 饱和湿度 |

| 换液频率 | 每2–3天 或依据培养基颜色/密度调整 |

| 传代比例 | 1:3 至 1:5 (密度达 0.8–1.2 × 10⁶ cells/mL 时) |

关键操作指南

复苏与初始培养

快速解冻 (37°C水浴，≤1分钟)，离心移除冻存液。

用含 IL-2 (20 U/mL) 的完全培养基重悬，接种于T25瓶或6孔板 (密度 ≥ 5×10⁵ cells/mL)。

前48小时保持高IL-2浓度，避免机械扰动。

传代流程

离心收集细胞 (250 × g, 5分钟)，用新鲜培养基 (+10–20 U/mL IL-2) 按比例重悬分瓶。

冻存方法

使用程序降温盒或冻存仪：

冻存液配方: 90% FBS + 10% DMSO，或商业无血清冻存液。

密度: 5–10 × 10⁶ cells/mL。

储存: 液氮气相 (-150°C) 或 -80°C (短期 <6个月)。

质量控制

| 检测项目 | 结果 | 方法 |

| 形态学 | 圆形悬浮细胞，聚集生长 | 显微镜观察 |

| 支原体检测 | 阴性 (提供批次报告) | PCR / Hoechst染色 |

| STR鉴定 | 人源匹配，无交叉污染 | 短串联重复序列分析 |

| IL-2依赖性 | 撤除IL-2后 72h 内增殖停止 | 生长曲线分析 |

| 标志物表达 | CD3⁺, CD4⁺, CD7⁺ (T细胞来源) | 流式细胞术 |

注意事项 (Critical Remarks)

IL-2依赖性：细胞存活严格依赖IL-2，务必确保每批次培养基添加足量活性IL-2。

聚集特性：静置时易形成团块，传代前轻柔吹打或过筛网 (40μm) 分散。

耐药表型：该细胞系对**多柔比星(Doxorubicin)**等化疗药天然耐药，适合耐药机制研究。

污染风险：定期检测支原体，避免与慢病毒包装细胞共培养。

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