非洲猪瘟(ASFV)检测试剂盒(荧光PCR法) 新品

商品属性：

非洲猪瘟(ASFV)检测试剂盒(荧光PCR法)是一种基于实时荧光PCR技术的分子诊断工具，用于快速、灵敏检测非洲猪瘟病毒核酸。

产品原理

采用TaqMan探针法或SYBR Green染料法，针对ASFV基因组中的保守区域（如p72基因或pp24基因）进行扩增和检测。在PCR过程中，荧光信号的产生与目标核酸量呈正相关，实现定量或定性分析。

产品特点

高灵敏度：最低检测限可达5-500 copies/μl，显著高于传统方法2PDF。

高特异性：特异性≥99%，不与其他病原体交叉反应2PDF。

快速高效：反应时间缩短至30-90分钟，适合现场筛查12PDF。

操作简便：一管式闭管反应，减少污染风险；支持自动化批量处理。

定量分析：通过Ct值判断病毒载量，辅助疫情评估。

操作步骤

样本处理：采集猪全血、组织（脾/淋巴结）或环境样本，提取核酸（0-4℃操作防降解）。

试剂配制：按说明书混合反应液（如20-25 μl体系：反应液14-18 μl + 酶0.25-1 μl），瞬时离心混匀。

加样与扩增：

加样顺序：阴性对照→样本→阳性对照，避免交叉污染。

PCR程序：95℃预变性2-5 min；40-45循环（95℃变性10-15 sec → 58-60℃延伸20-60 sec），60℃收集FAM荧光信号。

结果判定：

质控：阳性对照Ct≤30-35且有扩增曲线；阴性对照无Ct值或Ct≥。

样本：Ct≤35为阳性；Ct≥40为阴性；35<Ct≤40需复检。

注意事项

实验室分区：严格区分试剂准备、样本处理、PCR扩增区，专用耗材防交叉污染。

对照设置：每次实验需同步检测阴性/阳性对照，确保结果可靠。

储存与运输：反应液避光-20℃保存，避免反复冻融；试剂盒运输需冷链保障。

废弃物处理：扩增后PCR管密封丢弃，工作台用10%次氯酸钠消毒。

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