非洲猪瘟病毒（ASFV）检测试剂盒（恒温荧光法） 新品

非洲猪瘟病毒（ASFV）检测试剂盒（恒温荧光法）

试剂简介：

非洲猪瘟病毒（ASFV）检测试剂盒（恒温荧光法）是一种基于恒温荧光检测技术的核酸检测试剂盒，用于非洲猪瘟病毒的快速检测。

产品原理与组成

该试剂盒基于恒温荧光检测技术（如ERA等温扩增法），通过特异性引物和探针识别ASFV核酸片段，在恒温（如37℃）条件下进行指数级扩增，荧光信号由仪器实时捕获并自动判读结果。试剂盒主要组成包括：

反应液（A-ASFV-I）、酶混合物（B-I）、核酸释放剂（C-I）

阳性对照（PG-ASFV-I）和阴性对照（NG）

规格通常为50T或48T，-20℃保存，有效期12个月 

操作流程

样本处理：采集抗凝血、脾脏、扁桃体、淋巴结等组织样本，按说明书研磨或裂解处理。

DNA提取：使用病毒基因组DNA提取试剂盒（如吸附柱法或磁珠法），操作需在冰上进行。

试剂配制与加样：

计算反应体系（如N+2个样本），分装反应液至PCR管

加入模板DNA（2μl），顺序为阴性对照、待测样本、阳性对照。

扩增反应：

恒温仪器设置63℃反应30分钟，实时监测荧光信号

或使用荧光定量PCR仪，设置FAM荧光基团，63℃ 45秒收集信号。

结果判定

仪器自动判读：显示“阳性”则样本含ASFV，显示“阴性”则无或低于检测限（102 copies/μl）。

扩增曲线判定：出现“S”型曲线为阳性，无曲线为阴性；阴性对照无扩增、阳性对照有扩增时结果有效。

产品特点

操作简便快速：反应温度温和（37℃或63℃），无需热循环，10-15分钟完成扩增，适合现场即时检验。

高灵敏度与特异性：检出限102 copies/μl，特异性识别ASFV核酸，假阴性率低。

污染控制：闭管检测减少气溶胶污染，分区操作（试剂准备、样本制备、模板添加、扩增分析）避免交叉污染。

适用样本广：可检测抗凝血、脾脏、扁桃体、淋巴结、肾脏、骨髓及钝缘软蜱等样本。

注意事项

分区操作：试剂准备、样本制备、模板添加、扩增分析需物理隔离，避免污染。

避光保存：反应液对光敏感，避免反复冻融；使用后扩增管需密封丢弃，禁止开盖。

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