负鼠肾细胞；OK

                                                           负鼠肾细胞；OK
产品信息：

负鼠肾细胞（OK细胞）是一种源自北美负鼠（Didelphis virginiana）肾脏的近曲小管上皮细胞系，广泛用于肾脏生理学和毒理学研究。以下是其详细说明、培养操作和特性：

细胞来源   北美负鼠肾脏近曲小管上皮细胞

形态特征   上皮细胞样，贴壁生长，多边形且边界清晰

生长特性   倍增时间约18小时，密度高时易聚团

培养基   MEM培养基 + 10%胎牛血清（FBS） + 1%青霉素-链霉素（PS）

培养条件   37℃、5% CO、饱和湿度环境

传代方法   细胞密度达80%-90%时，用0.25%胰酶-EDTA消化，按1:2至1:6比例传代

冻存与复苏   冻存液为90% FBS+10% DMSO，程序降温后液氮保存；复苏时快速37℃水浴解冻，离心后重悬于新鲜培养基

应用领域   肾脏生理学研究、药物毒性测试、物质转运机制研究

OK细胞保留了肾脏近曲小管的许多功能特性，如主动转运葡萄糖、氨基酸和离子的能力，对血管紧张素II等激素有反应，可激活细胞内信号通路，影响生长、增殖及物质转运。这些特性使其成为研究肾脏功能和毒理学的理想模型。

培养操作要点：

细胞培养

是指在体外模拟体内环境（无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件），使细胞生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的技术。

根据细胞种类和生长方式，培养操作和特性各有不同。

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

基本操作步骤：

原代培养：取材→分离→培养，需保持材料新鲜及严格无菌。

传代培养：贴壁细胞需胰酶消化，悬浮细胞可直接传代，离心后重悬分瓶。

冻存与复苏：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后液氮保存；复苏时快速37℃水浴解冻。

具体特点如下：：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。

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