人脾细胞；MD

                                                           人脾细胞；MD
产品信息：

人脾细胞（MD）是一种从人脾脏组织中分离制备的细胞系，通常用于免疫学研究。以下是关于人脾细胞（MD）的详细说明、培养操作和特性：

1. 细胞特性

来源：人脾细胞（MD）通常从人脾脏组织中分离制备，脾脏是重要的淋巴器官，参与淋巴细胞迁移和免疫应答。

细胞类型：脾细胞是一类混合细胞群体，主要包括淋巴细胞（T细胞、B细胞）、巨噬细胞、树突状细胞等

形态：由于脾细胞是混合细胞群体，其形态多样，包括淋巴细胞样的小圆形细胞、巨噬细胞样的大吞噬细胞等。

功能特性：脾细胞参与免疫应答，包括抗原识别、细胞因子分泌、免疫调节等。

2. 培养操作

2.1. 培养基

基本培养基为DulbecCOs Modified Eagle’s Medium (DMEM)，配置培养基时需加入10%胎牛血清（FBS）和1%抗生素-抗真菌混合液（Anti-Anti）。

2.2. 培养条件

温度：37°C。

气体环境：95%空气 + 5% CO。

湿度：饱和湿度。

2.3. 细胞分离与培养

组织获取：在无菌条件下获取脾脏组织

组织处理：将脾脏组织剪碎，通过机械研磨或酶消化方法制备单细胞悬液

细胞分离：使用淋巴细胞分离液（如FiCOl-Paque）通过密度梯度离心法分离脾淋巴细胞

细胞计数与接种：使用细胞计数器计数细胞，调整细胞密度后接种到培养瓶中。

培养与观察：在37°C、5% CO培养箱中培养，定期观察细胞生长状态和形态变化。

2.4. 传代与冻存

传代：当细胞密度达到80%-90%时进行传代，使用胰蛋白酶-EDTA溶液消化细胞，按适当比例分装到新的培养瓶中。

冻存：使用含有90%胎牛血清和10%DMSO的冻存液，将细胞悬液分装到冻存管中，按照标准冻存程序逐步降温后存放在液氮罐中。

3. 注意事项

无菌操作：全程需严格无菌操作，避免污染。

细胞状态监控：定期观察细胞形态和生长状态，确保细胞健康。

用途限制：该细胞系仅供科研使用，不得用于临床或动物实验。

培养操作要点：

细胞培养

是指在体外模拟体内环境（无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件），使细胞生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的技术。

根据细胞种类和生长方式，培养操作和特性各有不同。

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

基本操作步骤：

原代培养：取材→分离→培养，需保持材料新鲜及严格无菌。

传代培养：贴壁细胞需胰酶消化，悬浮细胞可直接传代，离心后重悬分瓶。

冻存与复苏：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后液氮保存；复苏时快速37℃水浴解冻。

具体特点如下：：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。

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