γ-谷氨酸激酶(γ-GK)试剂盒分光法/24样 新品

γ-谷氨酸激酶(γ-GK)试剂盒分光法/24样

产品简介：

γ-谷氨酸激酶(y-GK,EC 2.7.2.11)是脯氨酸生物合成途径中的关键酶之一。催化由谷氨酸 生成脯氨酸途径的第一步反应。本试剂盒利用γ-GK 催化谷氨酸磷酸化，进一步转化为γ- 谷氨酰基异羟肟酸，在酸性条件下与 Fe3+形成 Hydroxamate-Fe3+ 复合物，通过检测该 复合物在535 nm  波长处的 OD  值，进而得出γ-GK 酶活力大小。该酶催化的反应方程 式：ATP+L-glutamate=ADP+L-glutamate 5-phosphate。

试剂盒组成和配制：

所需的仪器和用品：
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径1cm)、 水浴锅、离心机、可调式移液器、 研钵、冰和蒸馏水。

y -谷氨酸激酶(y- G K)酶活性检测:
建议正式实验前选取2个样本做预测定，了解本批样本情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费!

样本制备：
取约0 . 1g  组织，加入1mL  提取液，冰浴匀浆，12000rpm,4℃  离 心 1 0min,   取上清液待用。

[注]: 若增加样本量，可按照组织质量 (g): 提取液体积(mL)为1:5~10的比例进行提取。

细菌/细胞样本：

先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取约500万细菌或细胞加入1mL 提取液，

超声波破碎细菌或细胞(冰浴，功率200W, 超 声 3s,间 隔 1 0s,重复30次);12000rpm 4℃离心10min,   取上清，置冰上待测。

[注]: 若增加样本量，可按照细菌/细胞数量(10⁴):提取液 (mL)  为500~1000:1 的比例进行提取。

液体样本：

澄清的液体样本直接检测，若浑浊则离心后取上清检测。