线粒体-3-磷酸甘油脱氢酶(mt-GPD)活性试剂盒分光法/48样 新品

线粒体-3-磷酸甘油脱氢酶(mt-GPD)活性试剂盒分光法/48样

产品简介：

线粒体-3-磷酸甘油脱氢酶(mt-GPD) 存在于线粒体中，在3-磷酸甘油途径中起重要作用， 催化底物3-磷酸甘油生成磷酸二羟丙酮，同时生成的电子和氢进入呼吸链参与氧化磷酸化； 在电子传递体 (PMS)  存在下，使噻唑蓝 (MTT)  还原生成蓝色产物，通过检测该蓝色产  物在550nm 处的增加速率，即可得出 mt-GPD  活性大小。

试剂盒组成和配制：

所需的仪器和用品：

可见分光光度计、石英比色皿(光径1cm)、可调试移液器、台式离心机、水浴锅、研钵、冰和蒸馏水。

线粒体-3-磷酸甘油脱氢酶(mtGPD)酶活性检测:
建议正式实验前选取2个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费!

样本制备：
(提示：整个线粒体的提取过程须保持4℃低温环境):

①称取约0 . 1g 组织或收集500万细菌/细胞，加入1mL 试剂一，用冰浴匀浆器或研钵匀浆，转移至离心管后于4℃×700g离心10min。

②弃沉淀，上清液移至另一离心管中，4℃×12000g 离 心 1 0min。用移液器移除上清液(上清液即胞浆提取物，可用于测定从线粒体泄漏的酶活性(此步可选做)),留下沉淀(沉淀

即为线粒体)。

③在沉淀(线粒体)中加入200μL试剂二和2 μL 试剂三，超声波破碎(冰浴，功率20%或200W, 超声3s, 间10秒，重复30次),液体置于冰上用于线粒体-3-磷酸甘油脱氢酶

(mtGPD)活性测定。

[注]: 若增加样本量，可按照组织质量 (g): 提取液体积(mL) 为1:5~10的比例进行提取，或按照细菌/细胞数量(104):提取液 (mL)  为500~1000:1 的比例进行提取。行提取)。