ATP-磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(ATP-PEPCK)试剂盒分光法/48样 新品

ATP-磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(ATP-PEPCK)试剂盒分光法/48样

产品简介：

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 (PEPCK)属于裂解酶家族，分为两种类型：一类是ATP  依赖

性即ATP-PEPCK(EC  4.1.1.49),主要存在于开花植物、藻类及部分真菌和细菌中。另一 类是GTP 依赖性即GTP-PEPCK(EC   4.1.1.32),主要存在于哺乳动物、鸟类、鱼类、昆 虫、软体动物、扁虫、线虫、眼虫及部分真菌和细菌中。PEPCK-ATP  催化磷酸烯醇式丙 酮酸生成草酰乙酸，进一步在苹果酸脱氢酶的催化下，使 NADH 氧化生成 NAD+,  在 340nm 下测定 NADH 下降速率，即可反映 PEPCK 活性。

试剂盒组成和配制：

所需的仪器和用品：
紫外分光光度计、1mL  石英比色皿(光径1cm)、 台式离心机、可调式移液器、研 钵、冰和蒸馏水。

ATP-磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(ATP-PEPCK)酶活性检测:
建议正式实验前选取2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验

样本和试剂浪费!

线粒体制备
①组织样本：

称取约0. 1g  组织，加入1mL  提取液，进行冰浴匀浆。4℃×12000rpm  离 心 1 0min, 取上清，置冰上待测。

[注]: 若增加样本量，可按照组织质量 (g): 提取液体积(mL) 为1:5~10的比例进行提取。

②细菌/真菌样本：

先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取500万细菌或细胞加入1mL 提取液；

冰浴超声波破碎细菌或细胞(冰浴，功率20%或200W,   超 声 3s,   间 隔 1 0s,   重 复 3 0次);

4℃×12000rpm   离 心 1 0min,   取上清，置冰上待测。

[注]: 也可按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积 (mL)  为500~1000:1 的比例进

行提取。