人肝癌细胞-荧光素酶标记;HepG2-LUC

                                                           人肝癌细胞-荧光素酶标记;HepG2-LUC
产品信息：

HepG2-LUC细胞是一种经过基因工程改造的人肝癌细胞系，源自原有的HepG2细胞系，通过慢病毒转染技术稳定表达荧光素酶（Luciferase）。这种细胞系在生物医学研究中具有重要应用价值，特别是在活体成像和肿瘤研究领域。以下是关于HepG2-LUC细胞的详细说明、培养操作和特性：

细胞特性：

来源：HepG2-LUC细胞系源自一名15岁男性白人的肝癌组织，通过慢病毒转染技术导入荧光素酶基因，使其能够稳定表达萤火虫荧光素酶。

形态：上皮细胞样，贴壁生长。

生长特性：贴壁生长，倍增时间约为50-60小时。

荧光素酶表达：稳定表达萤火虫荧光素酶，可用于生物发光成像（BLI）和荧光素酶报告基因检测。

应用：广泛用于活体动物成像、肿瘤生长监测、药物筛选、基因表达研究等领域。

培养操作：

培养基：通常使用DMEM培养基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素/链霉素溶液。

培养条件：37℃、5% CO₂、饱和湿度环境。

传代比例：建议1:2至1:3传代，细胞密度达80%-90%时进行传代。

冻存条件：使用90%血清 + 10%DMSO的冻存液，程序降温至-80℃过夜后转入液氮储存。

复苏与传代步骤：

复苏细胞：

将冻存管在37℃水浴中迅速解冻，加入预热的完全培养基，离心（1000RPM，3-5分钟）。

弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，接种至T25培养瓶中，37℃培养箱培养过夜。

传代培养：

弃去旧培养基，用PBS润洗细胞1-2次。

加入胰酶-EDTA溶液消化细胞，显微镜下观察细胞变圆并脱落时，加入含血清的培养基终止消化。

离心后重悬细胞，按1:2至1:3比例分瓶继续培养。

注意事项：

定期检测支原体污染，确保细胞培养的纯净。

操作过程中需注意无菌操作，避免细胞污染。

HepG2-LUC细胞系在活体成像实验中需配合荧光素底物（如D-luciferin）使用，以观察生物发光信号。

细胞类型与特性：

原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。

细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。

细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。

根据生长方式分为：

贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。

悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。

半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。

特殊细胞的生物特性举例：

成纤维细胞：具丰富粗面内质网、高尔基体，能合成胶原纤维、弹性纤维及有机基质；在外伤刺激下可恢复幼稚状态，参与组织修复。

肿瘤细胞：具无限增殖、贴壁依赖或悬浮生长、易转化等特性，常用于药物筛选与癌变机制研究。

神经干细胞：具多向分化潜能（可分化为神经元、星形胶质细胞等），增殖能力强，在体外培养中可形成克隆球。

公司正在出售的产品：

注意事项与应用：

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。