人大细胞肺癌顺铂耐药株；NCI-H460/cis

产品信息：

NCI-H460/cis是人大细胞肺癌细胞系NCI-H460的顺铂（Cisplatin, Cis）耐药亚株，常用于肺癌耐药机制研究和药物筛选。

1. 细胞特性

来源与形态：NCI-H460/cis细胞来源于人大细胞肺癌细胞系NCI-H460，经顺铂诱导筛选获得，呈上皮细胞样形态，贴壁生长。

耐药性：对顺铂具有显著耐药性，常用于研究肺癌化疗耐药机制。

生长特性：贴壁生长，密度达80%-90%时即可传代，倍增时间约23-60小时。

分子特征：表达p53蛋白，具有大细胞肺癌典型特征。

培养操作

培养基：推荐使用RPMI-1640培养基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%双抗（青霉素/链霉素）。

培养条件：37℃，5% CO₂，饱和湿度环境。

传代方法：

弃去旧培养基，用PBS润洗细胞1-2次。

加入胰酶消化液（0.25% Trypsin-0.02% EDTA），37℃消化1-3分钟，显微镜下观察细胞变圆并脱落。

加入完全培养基终止消化，轻轻吹打使细胞脱落后离心（1000 rpm，3-5分钟），弃上清，用新鲜培养基重悬细胞。

按1:2至1:4的比例分瓶，补加新鲜培养基后继续培养。

冻存与复苏：

冻存：使用冻存液（90% FBS + 10% DMSO），将细胞悬液分装至冻存管中，程序降温（-80℃过夜）后转入液氮中长期保存。

复苏：从液氮中取出冻存管，迅速在37℃水浴中解冻，加入培养基混合均匀后离心，弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞后转入培养瓶中培养过夜。

3. 注意事项

耐药性维持：定期在培养基中添加顺铂以维持细胞耐药性。

无菌操作：严格遵守无菌操作规范，避免细菌、真菌等微生物污染。

使用限制：NCI-H460/cis细胞仅用于科研工作，未经许可不得用于其他目的，且不得转让给第三方。

细胞类型与特性：

原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。

细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。

细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。

根据生长方式分为：

贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。

悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。

半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。

功能特点

通过被动运输和主动运输实现物质跨膜转运；以ATP为核心载体，通过线粒体氧化磷酸化或叶绿体光合磷酸化途径供能；通过受体-第二信使-效应器的级联反应模式进行信号转导；原核细胞采用二分裂，真核细胞则通过有丝分裂、减数分裂等方式繁殖；细胞可进行程序性死亡（凋亡），并在多细胞生物中实现分化形成不同组织

不同类型细胞的特异性（生物特性差异）

形态多样性：细胞形态因功能而异，如成纤维细胞呈梭形或多角形，神经细胞有突起，上皮细胞呈多边形紧密排列；细菌细胞多为球形、杆状或螺旋形。

功能特异性：动物细胞依赖线粒体供能，植物细胞具叶绿体进行光合作用；原核细胞（如细菌）无细胞核，真核细胞（如动植物细胞）有核膜包裹的核；某些细胞如酵母细胞可进行出芽生殖，哺乳动物细胞则通过有丝分裂增殖。

生长特性：贴壁细胞需附着表面生长（如成纤维细胞），悬浮细胞可在培养液中自由生长（如血液细胞）；不同细胞分裂速度各异，如肿瘤细胞增殖较快，正常体细胞分裂较慢。

特殊细胞的生物特性举例

成纤维细胞：具丰富粗面内质网、高尔基体，能合成胶原纤维、弹性纤维及有机基质；在外伤刺激下可恢复幼稚状态，参与组织修复。

肿瘤细胞：具无限增殖、贴壁依赖或悬浮生长、易转化等特性，常用于药物筛选与癌变机制研究。

神经干细胞：具多向分化潜能（可分化为神经元、星形胶质细胞等），增殖能力强，在体外培养中可形成克隆球。

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