SJCRH30

产品信息：

SJCRH30是人骨髓横纹肌肉癌细胞系，来源于17岁白人男性横纹肌肉瘤患者的骨髓转移灶，常用于癌症及免疫学研究。以下是详细说明及培养操作和特性：

细胞特性

形态与生长：成纤维细胞样，贴壁生长。

种属来源：人类，组织来源为肌肉（骨髓转移灶）。

培养条件：37℃、5% CO₂、饱和湿度，使用RPMI1640培养基（含10%-15%胎牛血清及1%双抗）。

传代比例：1:2至1:4（首次建议1:2），每周换液2-3次。

冻存条件：无血清冻存液或90% FBS+10% DMSO，液氮保存。

生物安全等级：1级。

培养操作

复苏细胞：

37℃水浴快速解冻冻存管，加入完全培养基混匀。

1000 rpm离心3-5 min，弃上清，重悬后接种至培养瓶，37℃培养箱静置2-4 h。

传代细胞：

贴壁细胞：弃培养基，PBS润洗后加入0.25%胰酶-EDTA消化1-2 min（显微镜下观察细胞变圆），加入完全培养基终止消化，吹打混匀后离心（1000 rpm，3-5 min），重悬并按比例分瓶。

冻存细胞：

收集对数生长期细胞，离心后用冻存液（如90% FBS+10% DMSO）重悬至密度5×10⁶～1×10⁷/mL，分装至冻存管，-80℃放置24 h后转入液氮。

注意事项

收到细胞后需观察培养瓶是否完好，用75%酒精消毒瓶壁，显微镜检查细胞状态。

严格无菌操作，避免污染；培养基需预热，消化时间需严格控制（过长或过短均影响细胞活性）。

定期观察细胞生长状态，注意培养基pH值及细胞密度，及时换液或传代。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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功能特点

通过被动运输和主动运输实现物质跨膜转运；以ATP为核心载体，通过线粒体氧化磷酸化或叶绿体光合磷酸化途径供能；通过受体-第二信使-效应器的级联反应模式进行信号转导；原核细胞采用二分裂，真核细胞则通过有丝分裂、减数分裂等方式繁殖；细胞可进行程序性死亡（凋亡），并在多细胞生物中实现分化形成不同组织

注意事项与应用

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。