L132（人胚胎肺上皮细胞）

产品信息：

L132细胞是一种人胚胎肺成纤维细胞系，常用于呼吸道病毒研究、细胞毒性测试及药物筛选等领域。

细胞特性：

来源：L132细胞系源自人胚胎肺组织。

形态与生长：贴壁生长，呈成纤维细胞样或纺锤形形态，生长缓慢，倍增时间较长（约24-36小时）。

应用特性：常用于呼吸道病毒研究、细胞毒性测试、药物筛选等实验模型。

培养条件：

培养基配方：通常使用MEM基础培养基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素-链霉素（双抗）。

培养环境：37℃，5% CO₂，饱和湿度培养箱。

冻存条件：90% FBS + 10% DMSO，液氮或-80℃保存。

培养操作步骤：

细胞复苏：

从液氮中取出冻存管，迅速放入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶。

用75%的酒精擦拭冻存管外壁，然后将细胞悬液转移到含有5-6mL完全培养基的离心管中。

1000rpm离心3-5分钟，弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，然后接种至T25培养瓶中。

将培养瓶放入37℃、5% CO₂培养箱中培养，第二天换用新鲜完全培养基继续培养。

细胞传代：

当细胞密度达到80%-90%时，弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

加入1-2mL 0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA消化液，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况。

当细胞大部分变圆并脱落时，加入完全培养基终止消化，轻轻吹打细胞，使之完全脱落。

将细胞悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5分钟，弃去上清液，用1-2mL完全培养基重悬细胞。

将细胞悬液按1：2至1：6的比例分瓶，补充新鲜完全培养基至5-8ml/瓶，然后放入37℃、5% CO₂培养箱中培养。

细胞冻存：

收集对数生长期的细胞，1000rpm离心5分钟，弃去上清液。

用无血清细胞冻存液重悬细胞，使细胞密度为1×1:6～1×10⁷个/mL。

每支冻存管分装1mL细胞悬液，先放入-20℃冰箱1.5小时，然后移至-80℃冰箱过夜，24小时后转入液氮罐中长期保存。

注意事项：

无菌操作：全程需在生物安全柜内操作，定期检测支原体污染。

消化控制：胰酶消化时间不宜过长，避免细胞损伤。

细胞状态监控：定期观察细胞形态和生长状态，及时处理污染或异常情况。

细胞类型与特性：

原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。

细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。

细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。

根据生长方式分为：

贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。

悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。

半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。

功能特点

通过被动运输和主动运输实现物质跨膜转运；以ATP为核心载体，通过线粒体氧化磷酸化或叶绿体光合磷酸化途径供能；通过受体-第二信使-效应器的级联反应模式进行信号转导；原核细胞采用二分裂，真核细胞则通过有丝分裂、减数分裂等方式繁殖；细胞可进行程序性死亡（凋亡），并在多细胞生物中实现分化形成不同组织

不同类型细胞的特异性（生物特性差异）

形态多样性：细胞形态因功能而异，如成纤维细胞呈梭形或多角形，神经细胞有突起，上皮细胞呈多边形紧密排列；细菌细胞多为球形、杆状或螺旋形。

功能特异性：动物细胞依赖线粒体供能，植物细胞具叶绿体进行光合作用；原核细胞（如细菌）无细胞核，真核细胞（如动植物细胞）有核膜包裹的核；某些细胞如酵母细胞可进行出芽生殖，哺乳动物细胞则通过有丝分裂增殖。

生长特性：贴壁细胞需附着表面生长（如成纤维细胞），悬浮细胞可在培养液中自由生长（如血液细胞）；不同细胞分裂速度各异，如肿瘤细胞增殖较快，正常体细胞分裂较慢。

特殊细胞的生物特性举例

成纤维细胞：具丰富粗面内质网、高尔基体，能合成胶原纤维、弹性纤维及有机基质；在外伤刺激下可恢复幼稚状态，参与组织修复。

肿瘤细胞：具无限增殖、贴壁依赖或悬浮生长、易转化等特性，常用于药物筛选与癌变机制研究。

神经干细胞：具多向分化潜能（可分化为神经元、星形胶质细胞等），增殖能力强，在体外培养中可形成克隆球。

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