神经母细胞瘤NS20Y

                                                           神经母细胞瘤NS20Y
产品信息：

神经母细胞瘤NS20Y细胞是一种小鼠神经母细胞瘤细胞系，常用于神经生物学和肿瘤研究。

细胞特性：

来源：小鼠神经母细胞瘤细胞系。

生长特性：贴壁生长，上皮细胞样形态。

污染检测：通常不携带HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等污染物。

培养条件：

培养基配方：通常使用高糖DMEM培养基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素-链霉素。

培养环境：37℃，5% CO₂，饱和湿度培养箱。

冻存条件：90% FBS + 10% DMSO，液氮或-80℃保存。

培养操作步骤：

细胞复苏：

从液氮中取出冻存管，迅速放入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶。

用75%的酒精擦拭冻存管外壁，然后将细胞悬液转移到含有5-6mL完全培养基的离心管中。

1000rpm离心3-5分钟，弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，然后接种至T25培养瓶中。

将培养瓶放入37℃、5% CO₂培养箱中培养，第二天换用新鲜完全培养基继续培养。

细胞传代：

当细胞密度达到80%-90%时，弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

加入1-2mL 0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA消化液，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况。

当细胞大部分变圆并脱落时，加入完全培养基终止消化，轻轻吹打细胞，使之完全脱落。

将细胞悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5分钟，弃去上清液，用1-2mL完全培养基重悬细胞。

将细胞悬液按1：2至1：6的比例分瓶，补充新鲜完全培养基至5-8ml/瓶，然后放入37℃、5% CO₂培养箱中培养。

细胞冻存：

收集对数生长期的细胞，1000rpm离心5分钟，弃去上清液。

用无血清细胞冻存液重悬细胞，使细胞密度为1×10⁶～1×10⁷个/mL。

每支冻存管分装1mL细胞悬液，先放入-20℃冰箱1.5小时，然后移至-80℃冰箱过夜，24小时后转入液氮罐中长期保存。

注意事项：

收到细胞后，先用75%酒精喷洒整个瓶身消毒，然后放入37℃、5% CO₂培养箱中静置2-4小时，待细胞稳定后再进行后续操作。

运输用的培养基不可继续使用，需更换为新鲜的完全培养基。

细胞传代时，注意控制胰酶消化时间，避免过度消化导致细胞损伤。

建议在细胞培养前3代冻存一批种子细胞，以确保细胞的遗传稳定性。

细胞类型与特性：

原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。

细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。

细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。

根据生长方式分为：

贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。

悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。

半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。

特殊细胞的生物特性举例：

成纤维细胞：具丰富粗面内质网、高尔基体，能合成胶原纤维、弹性纤维及有机基质；在外伤刺激下可恢复幼稚状态，参与组织修复。

肿瘤细胞：具无限增殖、贴壁依赖或悬浮生长、易转化等特性，常用于药物筛选与癌变机制研究。

神经干细胞：具多向分化潜能（可分化为神经元、星形胶质细胞等），增殖能力强，在体外培养中可形成克隆球。

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注意事项与应用：

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。