Wis-2细胞

                                                           Wis-2细胞
产品信息：

Wis-2细胞是一种人源性上皮样贴壁细胞，常用于科研工作，推荐传代比例为1:2，培养条件为37℃、5%CO₂，使用含10%胎牛血清的完全培养基。

细胞特性

来源：人组织（具体来源未详述）

形态：上皮细胞样

生长特性：贴壁生长

应用：科研用途，如机制研究、药物筛选等

培养操作

复苏

将冻存管在37℃水浴中迅速解冻，加入完全培养基混合均匀，离心（1000RPM，3-5分钟），弃上清后用新鲜培养基重悬，接种至培养瓶中，37℃培养箱培养过夜，次日换液并检查细胞密度。

传代（细胞密度达80%-90%时进行）

贴壁细胞：弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗1-2次，加入消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）37℃消化1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆并脱落时终止消化，离心（1000RPM，5-10分钟），弃上清后用新鲜培养基重悬，按1:2至1:5比例分瓶。

冻存

生长状态良好的细胞用胰酶消化后离心，弃上清，加入无血清冻存液（或90%FBS+10%DMSO），细胞密度5×10⁶～1×10⁷/mL，混匀后分装至冻存管，直接放入-80℃冰箱，24小时后可转入液氮罐储存。

注意事项

收到细胞后需立即检查细胞瓶是否完好及污染情况，用75%酒精消毒瓶身，显微镜下观察细胞状态。

运输用的培养基不可重复使用，需更换新鲜配制的完全培养基。

首次传代建议T25培养瓶1:2传代，后续根据细胞生长情况调整传代比例。

定期检测支原体污染，建议进行STR鉴定确保细胞身份。

细胞类型与特性：

原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。

细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。

细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。

根据生长方式分为：

贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。

悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。

半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。

特殊细胞的生物特性举例：

成纤维细胞：具丰富粗面内质网、高尔基体，能合成胶原纤维、弹性纤维及有机基质；在外伤刺激下可恢复幼稚状态，参与组织修复。

肿瘤细胞：具无限增殖、贴壁依赖或悬浮生长、易转化等特性，常用于药物筛选与癌变机制研究。

神经干细胞：具多向分化潜能（可分化为神经元、星形胶质细胞等），增殖能力强，在体外培养中可形成克隆球。

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注意事项与应用：

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。