总抗氧化能力(T-AOC)测定试剂盒/比色法/50样

总抗氧化能力(T-AOC)测定试剂盒/比色法/50样

测定意义：

机体防御体系的抗氧化能力的强弱与健康程度存在着密切联系，该防御体系有酶促与非酶促两个体系，许多酶是以微量元素为活性中心，例如：超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽 S-转移酶（GST）等，非酶促反应体系中主要为维生素、氨基酸和金属蛋白质。

测定原理：

机体中有许多抗氧化物质，能使 Fe3+还原成 Fe2+，后者可与菲啉类物质形成稳固的络合物，通过比色可测出其抗氧化能力的高低。

例如：VE、胡萝卜素、VC、半胱氨酸、蛋氨酸、色氨酸、组氨酸、葡萄糖、铜兰蛋白、转铁蛋白、乳铁蛋

白等。这个体系的防护氧化作用主要通过三条途径：

（1）消除自由基和活性氧以免引发脂质过氧化；

（2）分解过氧化物，阻断过氧化链；

（3）除去起催化作用的金属离子。防御体系各成份之间相互起到了协同作用，以及代偿作用与依赖作用。

T-AOC测定样本前处理
1、血浆样本前处理：
血浆在测试前 3500  转／分离心 10  分钟，取上清待测，否则有些抗凝剂会引起沉淀及混浊，肝素抗凝的血浆不要离心，血清不需要离心。

2、组织样本的前处理：
组织匀浆的制备：
准确称取组织重量，按重量(g):体积(ml)=1:9  的比例，加入 9  倍体积的生理盐水，冰水浴条件下，制备成 10%的匀浆液，2500  转/分离心 10  分钟，取上清液待测。同时用考马斯亮蓝法测定匀浆蛋白浓度。

3、培养细胞的前处理：
培养细胞悬液的制备：
将培养细胞消化，离心，弃上清，留下层细胞，用生理盐水或匀浆介质制备成 107/cm3   的悬液，即 107/ml的悬液，再进行破碎。破碎细胞的方法有三种：

①、用匀浆器匀浆。（可以用匀浆机，也可以用玻璃匀浆器手工匀浆。）
②、用进口的超声粉碎器粉碎。
③、反复冻溶 3  次。（第③种方法有时会影响酶活力。）制备好的细胞悬液不需要离心，在测试加样前要摇匀后取样。同时用考马斯亮兰试剂测定组织蛋白。

组织样本简便操作表：

4、培养细胞的上清及部分体液均可以按照血清样本处理，一般直接加样。
5、全血样本前处理：一般用双蒸水 10  倍稀释，具体稀释倍数及取样量要做预试。