SNU-75细胞 新品

                                                           SNU-75细胞
产品信息：

SNU-75细胞是一种人胃癌细胞系，贴壁生长，具有上皮细胞样形态，广泛应用于胃癌研究和药物筛选。

细胞特性

来源与类型：人胃癌细胞系，贴壁生长，上皮细胞样形态。

污染检测：经检测不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等污染物。

分子特征：部分变体如SNU-75/RFP可表达红色荧光蛋白，用于标记追踪。

培养条件

培养基配方：DMEM（高糖） + 10% FBS（胎牛血清），37℃、5% CO₂培养箱中维持。

细胞状态：细胞活力高达95%（台盼蓝染色法检测），适合长期培养和实验。

冻存条件：90% FBS + 10% DMSO，液氮或-80℃长期保存。

培养操作步骤

收到细胞后的处理：

用75%酒精擦拭培养瓶，放入37℃、5% CO₂培养箱静置3-4小时稳定状态，然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。

细胞传代：

当细胞密度达80%-90%汇合度时，弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

加入0.25%胰蛋白酶消化液（约1-2ml），37℃消化1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆后，加入完全培养基终止消化，轻轻吹打使细胞脱落。

1000rpm离心5分钟，弃上清，用1-2ml完全培养基重悬细胞，按1:2至1:6比例分瓶，补充新鲜培养基至5-8ml/瓶，放入培养箱继续培养。

细胞冻存：

细胞生长至80%面积时，弃培养液，PBS清洗一次，加入胰酶消化液，消化后用完全培养基终止，吹打成悬液，1000rpm离心5分钟。

用冻存液（FBS:DMSO=9:1）重悬细胞，置于冻存管中；先放-20℃ 1.5小时，再移至-80℃过夜，24小时后转入液氮长期保存。

细胞复苏：

从液氮中取出冻存管，快速置于37℃水浴解冻，加入5ml完全培养基混匀，1000rpm离心5分钟，弃上清，用5ml完全培养基重悬细胞，接种至25cm2培养瓶，37℃、5% CO₂培养箱中培养，第二天换新鲜培养液。

注意事项

接收处理：运输用培养液不可重复使用，需换新鲜培养液；部分细胞贴壁不牢，运输中易脱落，属正常现象，可离心收集后重悬分瓶。

无菌操作：全程严格无菌，定期检测支原体等污染；避免过度消化或机械损伤。

售后条款：若运输中出现瓶身破损、培养液漏液等问题可申请重发；细胞污染或活性问题需在48小时内提供清晰照片。

基本操作步骤：

原代培养：取材→分离→培养，需保持材料新鲜及严格无菌2。

传代培养：贴壁细胞需胰酶消化，悬浮细胞可直接传代，离心后重悬分瓶23。

冻存与复苏：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后液氮保存；复苏时快速37℃水浴解冻。

具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。

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注意事项与应用：

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。