sNF022细胞

产品信息：

sNF022细胞是一种贴壁生长的细胞系，培养时使用含10%胎牛血清的DMEM高糖培养基，在37℃、5% CO₂条件下培养；细胞活力高达95%，不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等污染。

细胞基本说明

来源与形态：具体组织来源未明确说明，但属于贴壁细胞，形态未详细描述。

生长特性：倍增时间未明确，但传代建议为1:4～1:6，每周需换液2～3次。

质量控制：细胞经检测，不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等微生物。

培养操作步骤

复苏细胞：将冻存管在37℃水浴迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀；1000rpm离心3min，弃上清，加1-2mL培养基重悬后转入培养瓶，加入适量培养基培养过夜；第二天换液并检查细胞密度。

传代培养：当细胞密度达到80%-90%时进行传代。

贴壁细胞：弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗1-2次；加入0.25%胰蛋白酶消化液（约1-2mL）于37℃消化1-2min，在显微镜下观察细胞变圆并脱落，加入完全培养基终止消化，轻轻吹打使细胞脱落并混匀；离心（1000rpm，5min），弃上清，补加1-2mL培养液重悬，按1:2～1:6比例分瓶，加入5-8mL培养基继续培养。

冻存细胞：收集对数生长期细胞，离心后弃上清，加入无血清细胞冻存液（使细胞密度5×10⁶～1×10⁷/mL），混匀后分装冻存管（1mL/管），放入-80℃冰箱，24h后转入液氮灌储存。

注意事项

收到细胞后应观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有问题及时联系供应商。

严格遵守无菌操作，使用预冷的培养基和试剂，避免污染。

细胞培养过程中需定期检查细胞状态，确保密度和活力，避免过度生长或污染

具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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