SKG-M细胞

产品信息：

SKG-M细胞是一种人急性髓系白血病细胞系，具有悬浮生长特性，培养时需使用含10%胎牛血清的DMEM高糖培养基，在37℃、5% CO₂条件下培养。

细胞特性

来源与形态：SKG-M细胞来源于人急性髓系白血病（AML），呈淋巴母细胞样形态，悬浮生长并部分聚团。

分子特征：细胞不携带HIV-1、HBV、HCV、支原体等污染，适用于肿瘤机制研究和药物筛选。

生长特性：细胞密度维持在1×10⁵～1×10⁶个/mL，聚团现象常见，需定期传代防止过度生长。

培养条件

培养基配方：DMEM（高糖）+10%胎牛血清（FBS）+1%双抗（青霉素/链霉素），现配现用。

培养环境：37℃、5% CO₂、湿度70%-80%的培养箱，避免温度/湿度波动。

冻存条件：90% FBS+10% DMSO，液氮或-80℃长期保存，复苏后存活率60%-90%。

培养操作步骤

复苏细胞：

冻存管37℃水浴快速解冻（1分钟内），转移至含4-6mL完全培养基的离心管。

1000rpm离心3-5分钟，弃上清，用新鲜培养基重悬后接种T25瓶，37℃培养过夜。

第二天换液并观察细胞密度，确保活力>95%（台盼蓝染色法）。

传代培养：

细胞密度达80%-90%时传代（如T25瓶1:2传代）。

对于悬浮细胞：收集悬液至离心管，1000rpm离心5分钟，弃上清，用1-2mL培养基重悬，按1:2～1:5比例分瓶（如两个T25瓶），补加6-8mL新鲜培养基。

每2-3天换液一次，传代比例可调整为1:4～1:6（ATCC来源）。

冻存操作：

细胞生长至对数期时，胰酶消化并计数（推荐冻存密度1×10⁶～1×10⁷个/mL）。

1000rpm离心3-5分钟，弃上清，用冻存液重悬，1mL/管分装至冻存管。

程序降温盒中-80℃放置24小时后转入液氮罐。

注意事项

接收处理：收到细胞后用75%酒精消毒瓶身，静置3-4小时稳定状态；运输用灌液培养基不可继续使用，需更换新鲜培养基。

无菌操作：全程在生物安全柜进行，定期检测支原体等污染；避免过度消化（贴壁细胞）或机械损伤。

细胞保种：建议培养前3代冻存一批种子细胞，确保遗传稳定性。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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功能特点

通过被动运输和主动运输实现物质跨膜转运；以ATP为核心载体，通过线粒体氧化磷酸化或叶绿体光合磷酸化途径供能；通过受体-第二信使-效应器的级联反应模式进行信号转导；原核细胞采用二分裂，真核细胞则通过有丝分裂、减数分裂等方式繁殖；细胞可进行程序性死亡（凋亡），并在多细胞生物中实现分化形成不同组织