RPMI-8866细胞

                                                           RPMI-8866细胞
产品信息：

RPMI-8866细胞是一种人B淋巴细胞白血病细胞系，悬浮生长并可能聚团，通常使用含10%胎牛血清和1%双抗的RPMI-1640或DMEM高糖培养基，在37℃、5% CO₂条件下培养；细胞复苏后建议首次传代按1:2分瓶，当细胞密度达到80%-90%时进行传代，悬浮细胞可直接离心收集后重悬分瓶，推荐传代比例1:2至1:5，冻存建议使用含10%DMSO的血清冻存液。

细胞基本说明

来源与背景：源自人B淋巴细胞白血病组织，种属为人，部分来源标明为ATCC；细胞形态为淋巴母细胞样，悬浮生长并可能部分聚团。

生长特性：倍增时间约24-36小时，传代周期通常为2-3天，每周换液2-3次；部分亚型可呈半贴壁状态，密集培养时可见巨大空泡，属正常特性。

生物安全：生物安全等级为1级，HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、真菌等检测均为阴性。

培养操作步骤

复苏细胞：将冻存管在37℃水浴快速解冻（1-2分钟），酒精消毒外壁，转移至离心管加4-6mL预热完全培养基混匀，1000rpm离心3-5分钟，弃上清后用新鲜培养基重悬，接种T25瓶（6-8mL/瓶），培养过夜后换液并检查细胞密度。

细胞传代：密度达80%-90%时进行。悬浮细胞——可直接收集细胞悬液，1000rpm离心5分钟，弃上清，补加1-2mL新鲜培养基重悬，按1:2至1:5比例分瓶（补充6-8mL/瓶完全培养基）；半贴壁细胞——可离心收集脱落细胞后传代。

细胞冻存：生长至覆盖80%培养瓶面积时，弃培养基，PBS清洗一次；加1mL胰酶消化液（细胞变圆脱落），加5mL完全培养基终止消化，离心（1000rpm，5分钟），弃上清；用无血清冻存液（如90%FBS+10%DMSO）重悬，调整细胞密度至1×10⁶/mL以上，分装冻存管，程序降温后转入液氮长期保存。

注意事项与售后条款

运输处理：常温运输复苏需75%酒精消毒瓶身，静置2-4小时后观察状态；干冰运输冻存需立即37℃水浴解冻。运输中贴壁细胞脱落可离心收集后传代，属正常现象。

污染防控：严格无菌操作，若培养基浑浊或瓶身破损需立即联系供应商；售后条款通常要求48小时内提交污染证据（如台盼蓝染色照片），核实后可重发。

使用限制：仅用于科研，未经许可不得转让第三方；首次传代建议1:2分瓶，2-3天换液一次。

基本操作步骤：

原代培养：取材→分离→培养，需保持材料新鲜及严格无菌2。

传代培养：贴壁细胞需胰酶消化，悬浮细胞可直接传代，离心后重悬分瓶23。

冻存与复苏：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后液氮保存；复苏时快速37℃水浴解冻。

具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。

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注意事项与应用：

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。