OUMS-23细胞

产品信息：

OUMS-23细胞是源自人结肠组织的癌细胞系，种属来源为人，组织来源为结肠，细胞形态呈上皮细胞样，生长特性为贴壁生长，培养条件推荐使用DMEM培养基并添加10%胎牛血清，在37℃、5% CO2环境下培养。冻存条件为90% FBS + 10% DMSO，建议1×10⁶ cells/T25或1 mL冻存管规格。

细胞培养操作步骤

复苏步骤

37℃水浴快速解冻冻存管（约1分钟），酒精消毒管壁后转入生物安全柜。

将细胞悬液转移至含5mL预热完全培养基的离心管，150g离心5分钟，弃上清后用新鲜培养基重悬，接种至T25培养瓶，37℃、5% CO2培养箱培养。

次日更换新鲜培养基。

传代步骤

细胞密度达80%-90%时进行传代。弃培养基，PBS润洗1-2次。

加入1mL 0.25% Trypsin-EDTA消化液，37℃孵育3-5分钟，显微镜下观察细胞变圆脱壁后加入2mL完全培养基终止消化。

轻柔吹打形成单细胞悬液，150g离心5分钟，弃上清后用新鲜培养基重悬，按1:2-1:3比例分瓶（如两个T25瓶），补充培养基至5-8mL/瓶。

冻存步骤

对数生长期细胞用胰酶消化后离心，弃上清，用含10%DMSO的FBS重悬细胞（密度≥1×10⁶ cells/mL），分装至冻存管（1mL/管）。

程序降温盒中-80℃放置2小时后转入液氮罐长期保存。

培养注意事项

收到细胞后处理：干冰运输需立即-80℃冻存或复苏；常温运输需取出培养瓶观察污染情况，贴壁细胞可直接培养，悬浮细胞需离心富集。

培养基选择：基础培养基为DMEM+10% FBS，部分来源提及MEM培养基，需根据细胞状态调整。

污染防控：培养液需检测HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、真菌等，确保无污染。

操作规范：消化时控制胰酶作用时间，避免过度消化损伤细胞；复苏后次日更换培养基以去除死细胞碎片。

具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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