NCI-H2227细胞 新品

产品信息：

NCI-H2227细胞是一种人小细胞肺癌细胞系，于1989年8月从一名54岁白人男性小细胞肺癌皮肤转移灶中分离得到，呈上皮细胞样形态，具有半贴半悬的生长特性。

细胞特性

来源背景：源自54岁男性小细胞肺癌皮肤转移灶，种属为人，组织来源为肺

形态特征：上皮细胞样，呈半贴半悬生长方式

生长特性：既可贴壁生长，也能悬浮生长，属于混合生长类型

生物安全：生物安全等级为1级，支原体检测为阴性

培养条件

培养基：推荐使用HITES+5%FBS或DMEM/F12培养基，添加胰岛素、转铁蛋白等补充物

培养环境：37℃，5%二氧化碳，95%空气环境

冻存条件：采用无血清冻存液，液氮储存

操作方法

复苏流程：

冻存管37℃水浴快速解冻，加入4mL培养基混匀

1000RPM离心4分钟，弃上清后用新鲜培养基重悬

接种至T25培养瓶，37℃培养箱培养过夜

传代步骤：

细胞密度达80%-90%时进行传代

PBS清洗后加入1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）37℃消化1-2分钟

显微镜下观察细胞变圆脱落，加入完全培养基终止消化

离心后按1:2比例分瓶传代

冻存操作：

收集对数生长期细胞，离心后弃培养基

用无血清冻存液重悬，细胞密度5×10⁶～1×10⁷/mL

1mL/管分装，-80℃过夜后转入液氮罐长期保存

注意事项

收到细胞后需检查包装完整性，用75%酒精消毒表面

培养过程中可出现部分细胞漂浮，属正常现象

运输用灌液培养基不可继续使用，需更换新鲜培养基

该细胞仅限科研使用，不可用于临床诊断或治疗

NCI-H2227细胞在肺癌机制研究、药物筛选和毒性测试中具有重要应用价值，规范培养可确保实验结果可靠性。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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功能特点

通过被动运输和主动运输实现物质跨膜转运；以ATP为核心载体，通过线粒体氧化磷酸化或叶绿体光合磷酸化途径供能；通过受体-第二信使-效应器的级联反应模式进行信号转导；原核细胞采用二分裂，真核细胞则通过有丝分裂、减数分裂等方式繁殖；细胞可进行程序性死亡（凋亡），并在多细胞生物中实现分化形成不同组织