NCI-H187[H187]细胞

产品信息：

NCI-H187[H187]细胞为人小细胞肺癌细胞系，来源于47岁男性胸腔积液，悬浮生长，形态为表皮细胞样；培养使用RPMI-1640基础培养基（加10%胎牛血清及1%双抗），在37℃、5% CO₂环境下培养；当细胞密度达80%-90%时，用不含钙镁离子的PBS润洗，再加0.25%胰酶-EDTA消化1-2分钟，终止消化后离心分瓶，推荐传代比例1:2至1:4（首次建议1:2），冻存建议用含10%DMSO的血清冻存液程序降温后转入液氮保存。

细胞基本特性

来源与形态：该细胞系由ATCC（CRL-5804）等保藏中心提供，源自治疗前患者胸腔积液，种属为人，组织来源为肺（胸腔积液），年龄/性别为47岁男性；形态为表皮细胞样，悬浮生长（部分文献描述为贴壁或贴壁/悬浮双能，但主流为悬浮）。

生长特性：倍增时间约24-30小时，传代比例1:2至1:4，每周换液2-3次；密集培养时可见巨大空泡（正常特性）；生物安全等级1级，HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。

培养条件与操作步骤

基础培养基：推荐RPMI-1640（亦可用DMEM/F12等），加10%胎牛血清（FBS，部分建议10%-20%）、1%双抗（青霉素/链霉素），环境为37℃、5% CO₂、饱和湿度（或95%空气、5% CO₂）。

复苏操作：冻存管37℃水浴快速解冻（1分钟内），加4-5mL预热完全培养基混匀，1000rpm离心4-5分钟，弃上清后用新鲜培养基重悬，接种T25瓶（约8mL/瓶），次日换液并检查密度。

传代操作：悬浮细胞可直接收集离心（1000rpm，3-5分钟），弃上清后用培养基重悬，按1:2至1:5分瓶；贴壁细胞需先用PBS润洗，再加0.25%胰酶-EDTA消化1-2分钟，终止后吹打均匀，离心分瓶（具体按实验室细胞说明书调整）。

冻存操作：细胞生长良好时，弃培养基，PBS清洗一次，加胰酶消化（或直接收集悬浮细胞），离心（1000rpm，4-10分钟），弃上清；用含10%DMSO的血清冻存液重悬（如90%FBS+10%DMSO），调整密度至1×10⁶/mL以上，分装冻存管，程序降温（如-80℃过夜）后转入液氮长期保存。

注意事项与售后条款

运输处理：常温运输复苏细胞需75%酒精消毒瓶身，静置2-4小时后观察状态；干冰运输冻存细胞需立即37℃水浴解冻。运输中脱落的贴壁细胞可离心收集后传代，属正常现象。

污染防控：严格无菌操作，若培养基浑浊或瓶身破损需立即联系供应商；售后条款通常要求48小时内提交污染证据（如台盼蓝染色照片），核实后可重发。

使用限制：细胞仅用于科研，未经许可不得转让第三方；首次传代建议1:2分瓶，2-3天换液一次。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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功能特点

通过被动运输和主动运输实现物质跨膜转运；以ATP为核心载体，通过线粒体氧化磷酸化或叶绿体光合磷酸化途径供能；通过受体-第二信使-效应器的级联反应模式进行信号转导；原核细胞采用二分裂，真核细胞则通过有丝分裂、减数分裂等方式繁殖；细胞可进行程序性死亡（凋亡），并在多细胞生物中实现分化形成不同组织