NCI-H1836细胞 新品

                                                           NCI-H1836细胞
产品信息：

NCI-H1836细胞是人小细胞肺癌细胞系，常用于肺癌研究和药物筛选。

细胞特性

来源与背景：NCI-H1836细胞系源自人小细胞肺癌组织，是一种高度恶性的神经内分泌肿瘤细胞系，常用于肺癌研究和药物筛选。

形态与生长：细胞呈上皮细胞样形态，贴壁生长，倍增时间约为24-30小时。

分子特征：表达小细胞肺癌相关标志物，如突触素（Synaptophysin）和嗜铬粒蛋白A（Chromogranin A），适用于肺癌发生机制、信号通路及药物靶向研究。

培养条件

培养基：推荐使用DMEM/F-12培养基，添加5%胎牛血清（FBS）、2 mM L-谷氨酰胺及1%抗生素抗真菌混合液（双抗），37℃、5% CO₂培养箱中培养。

传代与冻存：细胞密度达80%-90%时进行传代，传代比例1:2-1:5；冻存条件为90%FBS+10%DMSO或无血清冻存液，液氮长期保存。

培养操作

复苏：将冻存管在37℃水浴中快速解冻，加入5mL完全培养基混匀，1000rpm离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀，接种于T25培养瓶或6cm皿，培养过夜。

传代：弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次，加入1-2mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于37℃消化1-2分钟，细胞变圆脱落时，加5mL以上含10%血清的完全培养基终止消化，轻轻吹打均匀，离心（1000rpm，8-10分钟），弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，按1:2至1:5比例分到新的含5-6mL培养基的新皿或瓶中。

冻存：选择处于对数生长期的细胞，用0.25%胰蛋白酶消化，加入少量新培养液，吹打成均匀悬液，离心（1000rpm，10分钟），弃上清液，用适量冻存液重悬细胞（细胞密度5×10⁶～1×10⁷/mL），分装至冻存管中，先将冻存管放置于-80℃冰箱，24小时后转入液氮灌储存。

优点与局限性

优点：作为小细胞肺癌模型细胞，实验重复性强，适合高通量筛选及药物敏感性研究。

局限：单一细胞系不能完全代表小细胞肺癌异质性，需结合体内模型验证。

注意事项

收到细胞后检查瓶体完整性及污染迹象，75%酒精消毒瓶表面，显微镜观察细胞状态并拍照留存。

运输用的培养基不可再用于细胞培养，需换新配制完全培养基；首次传代建议保留原瓶培养基对比培养。

基本操作步骤：

原代培养：取材→分离→培养，需保持材料新鲜及严格无菌2。

传代培养：贴壁细胞需胰酶消化，悬浮细胞可直接传代，离心后重悬分瓶23。

冻存与复苏：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后液氮保存；复苏时快速37℃水浴解冻。

具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。

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注意事项与应用：

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。