MMAc·SF细胞 新品

产品信息：

MMAc·SF细胞是一种人源黑色素瘤贴壁细胞系，细胞形态为上皮细胞样，推荐使用含10%胎牛血清的完全培养基（如DMEM或RPMI 1640），在37℃、5% CO₂培养箱中培养。

细胞来源与基本特性

物种与组织来源：人源黑色素瘤细胞，贴壁生长，形态为上皮细胞样。

生长特性：贴壁生长，增殖稳定，群体倍增时间约24-30小时；可用于肿瘤及黑色素瘤相关研究。

应用领域：可用于病毒培养、细胞毒性测试及大规模蛋白表达研究。

培养操作步骤

复苏：将冻存管在37°C水浴中迅速解冻，加入完全培养基混合均匀，离心（1000RPM，5分钟），弃上清后用新鲜培养基重悬，接种至T25培养瓶或6cm皿，37℃培养箱培养过夜，第二天换液并检查细胞密度。

传代：当细胞密度达80%-90%时进行传代。弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗1-2次，加入1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA），37℃消化1-2分钟，镜下观察细胞变圆并脱落时终止消化，离心（1000RPM，5-10分钟），弃上清后用新鲜培养基重悬，按1:2至1:5比例分瓶。

冻存：使用无血清冻存液或90% FBS + 10% DMSO，细胞密度不低于1×10⁶/mL，程序降温后转入液氮或-80℃冰箱长期保存。

关键注意事项

培养基更换：运输用的培养基不可重复使用，需更换新鲜配制的完全培养基。

收到细胞处理：用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态；将T25瓶置于37℃、5%CO2培养箱中放置2-4h稳定状态，当细胞密度达80%-90%时进行首次传代。

质量控制：定期检测支原体污染，建议进行物种鉴定（如STR检测），监控细胞形态及生长一致性。

具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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