MKPL-1细胞

产品信息：

MKPL-1细胞是一种人乳腺癌细胞系，具有贴壁生长特性，形态呈上皮细胞样；培养需使用DMEM（高糖）或RPMI-1640基础培养基，添加10%胎牛血清（FBS），在37℃、5% CO₂条件下培养；细胞传代推荐1:2至1:3比例，当密度达80%-90%时进行，消化使用0.25%胰酶-EDTA（1-2分钟），冻存建议含10%DMSO的血清冻存液程序降温保存。

细胞基本说明

来源与特性：MKPL-1细胞源自人乳腺癌组织，属贴壁生长型，形态为上皮细胞样；部分亚系如MKPL-1/LUC、GFP或RFP标记可用于荧光示踪。细胞不携带HIV-1、HBV、HCV、支原体等病原体，生物安全等级为1级。

生长特性：常规培养下倍增时间约24-30小时，传代周期2-3天，每周换液2-3次；细胞活力达95%（台盼蓝检测），可长期传代维持。

培养操作步骤

基础培养基：推荐DMEM（高糖）或RPMI-1640，添加10%FBS及1%双抗（青霉素/链霉素），环境为37℃、5% CO₂及95%空气。

复苏操作：液氮取出冻存管后，37℃水浴快速解冻（1分钟内），酒精消毒外壁，转移至离心管加5-10mL预热完全培养基混匀，1000rpm离心3-5分钟，弃上清后用新鲜培养基重悬，接种T25瓶（5-8mL/瓶），次日换液并检查状态。

传代操作：贴壁细胞——弃旧培养基，PBS润洗1-2次；加1-2mL 0.25%胰酶-EDTA消化液，37℃孵育1-2分钟，镜下观察细胞变圆脱落，加5mL完全培养基终止消化，吹打均匀后1000rpm离心5分钟，弃上清用新鲜培养基重悬，按1:2至1:5分瓶（如两个T25瓶），补充5-8mL/瓶完全培养基。悬浮细胞：收集悬液，1000rpm离心5-10分钟，弃上清，补加1-2mL培养液重悬，按1:2至1:5分瓶或半数换液法。

冻存操作：细胞生长至80%汇合度时，弃培养基，PBS清洗一次；加适量胰酶消化（细胞变圆脱落），加完全培养基终止消化，离心（1000rpm，4-10分钟），弃上清；用无血清冻存液（如90%FBS+10%DMSO）重悬，调整细胞密度至1×10⁶/mL以上，分装冻存管，程序降温（如-20℃ 1.5h后转入-80℃），24小时后转入液氮保存。

注意事项与售后条款

运输处理：常温运输复苏细胞需75%酒精消毒瓶身，静置2-4小时后观察状态；干冰运输冻存细胞需立即37℃水浴解冻。运输中脱落的贴壁细胞可离心收集后传代，属正常现象。

污染防控：严格无菌操作，若培养基浑浊或瓶身破损需立即联系供应商；售后条款通常要求48小时内提交污染证据（如台盼蓝染色照片），核实后可重发。

使用限制：细胞仅用于科研，未经许可不得转让第三方；首次传代建议1:2分瓶，2-3天换液一次。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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功能特点

通过被动运输和主动运输实现物质跨膜转运；以ATP为核心载体，通过线粒体氧化磷酸化或叶绿体光合磷酸化途径供能；通过受体-第二信使-效应器的级联反应模式进行信号转导；原核细胞采用二分裂，真核细胞则通过有丝分裂、减数分裂等方式繁殖；细胞可进行程序性死亡（凋亡），并在多细胞生物中实现分化形成不同组织