MES235细胞

                                                           MES235细胞
产品信息：

MES235细胞是鼠源多巴胺能神经元细胞系，来源于大鼠/小鼠杂交的多巴胺能神经元组织，呈上皮细胞样形态，贴壁生长，常用于神经科学研究、帕金森病模型及药物筛选。

细胞特性

来源与背景：种属来源为大鼠/小鼠杂交，组织来源为多巴胺能神经元细胞，品系属于鼠多巴胺能神经元细胞，用于神经功能及退行性疾病研究。

形态与生长：上皮细胞样，贴壁生长，倍增时间约24-30小时，可在T25培养瓶或6cm皿中培养。

分子与应用：表达多巴胺能神经元相关标志物，适用于神经递质机制、药物毒性及保护研究。

培养条件

培养基与环境：推荐使用DMEM培养基，添加10%胎牛血清（FBS）及1%双抗（青霉素/链霉素），37℃、5% CO₂培养箱中培养。

传代与冻存：传代比例1:2-1:5（首次建议1:2），每2-3天换液一次；冻存条件为90%FBS+10%DMSO或无血清冻存液，液氮长期保存。

培养操作

复苏：冻存管37℃水浴快速解冻，加入4-6 mL完全培养基混匀，1000 rpm离心4-5分钟，弃上清后重悬接种于T25培养瓶或6 cm皿，培养过夜。

传代：密度达80%-90%时进行。贴壁细胞：弃培养基，PBS润洗，加1-2 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）37℃消化1-2分钟，细胞变圆脱落时加5 mL以上完全培养基终止，吹打混匀，离心（1000 rpm，4-10分钟），弃上清，用1-2 mL培养基重悬，按1:2至1:5分瓶，补足培养基继续培养。

冻存：生长良好时收集细胞，PBS清洗，加1 mL胰酶消化，制成悬液，1000 rpm离心5分钟，弃上清，加1 mL血清重悬，按细胞数量加入血清和DMSO（终浓度10%），分装冻存管（密度≥1×10⁶/mL），程序降温后-80℃保存2小时转入液氮。

优点与局限性

优点：作为神经元模型细胞，实验重复性强，适合机制研究和药物筛选；模拟多巴胺能神经元功能及疾病。

局限：单一细胞系不能完全代表神经组织异质性，需结合体内模型验证。

注意事项：收到细胞后检查瓶体完整性及污染迹象，75%酒精消毒表面，显微镜观察细胞状态并拍照留存；运输用的培养基不可再用于细胞培养，需换新配制完全培养基；首次传代建议保留原瓶培养基对比培养。

基本操作步骤：

原代培养：取材→分离→培养，需保持材料新鲜及严格无菌2。

传代培养：贴壁细胞需胰酶消化，悬浮细胞可直接传代，离心后重悬分瓶23。

冻存与复苏：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后液氮保存；复苏时快速37℃水浴解冻。

具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。

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注意事项与应用：

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。