MCB3901(AV12-664)细胞

产品信息：

MCB3901(AV12-664)是一种金黄地鼠腺病毒12诱导的肿瘤细胞系，具有成纤维细胞样形态，以贴壁方式生长，倍增时间为14至16小时。

细胞基本信息

来源与特性：该细胞系由腺病毒12诱导金黄地鼠肿瘤形成，常用于科研转染实验，可作为外源基因表达的宿主细胞。

基因表达：表达腺病毒12早期区蛋白，在BK病毒增强子-腺病毒晚期启动子系统中具有应用价值。

DNA图谱：包括Amelogenin: X,Y；CSF1PO: 11,12；D5S818: 12,13等特异性基因座。

培养条件

培养基：DMEM培养基加10%胎牛血清（FBS），在37℃、5% CO₂环境下培养。

冻存条件：90% FBS加10% DMSO作为冻存液，短期可存于-80℃冰箱，长期需转入液氮罐。

操作步骤

复苏细胞

将冻存管在37℃水浴中快速解冻，加入5mL预热培养基混匀，1000RPM离心5分钟弃上清，重悬后转入培养瓶过夜。

传代培养

贴壁细胞：

细胞密度达80%-90%时进行传代

PBS清洗后加入0.25%胰蛋白酶消化液，37℃孵育1-2分钟

显微镜下观察细胞变圆脱落，加入完全培养基终止消化

离心收集细胞，按1:2至1:5比例分瓶传代

悬浮细胞：可采用半换液法或离心法传代。

冻存操作

细胞生长至80%汇合度时，用胰酶消化后离心收集，加入无血清冻存液，按5×10⁶～1×10⁷/mL密度分装至冻存管，先置于-80℃冰箱24小时后再转入液氮罐保存。

注意事项

收到细胞后需立即消毒处理，显微镜检查污染情况；贴壁不牢的细胞在运输中易发生脱落，属正常现象，可离心收集后继续培养。

培养过程中需严格无菌操作，确保培养条件一致，避免因操作不当导致细胞状态异常。

具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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