KMM-1细胞 新品

                                                           KMM-1细胞
产品信息：

KMM-1细胞是一种人多发性骨髓瘤细胞系，呈淋巴细胞样形态，悬浮生长，常用于血液系统肿瘤研究和药物筛选。

细胞特性

来源与背景：KMM-1细胞源自人骨髓瘤组织，种属来源为人，组织来源为骨髓，肿瘤类型为多发性骨髓瘤。

形态与生长：呈淋巴细胞样形态，悬浮生长，部分细胞在运输中易脱落，属正常现象。

分子特征：未查询到具体分子标志，作为骨髓瘤细胞系，可能表达骨髓瘤相关标志物。

培养条件

培养基：推荐使用Ham F12 medium + 10% fetal bovine serum（FBS），或DMEM培养基，添加1%青霉素/链霉素（P/S）。

培养环境：37℃，5% CO₂，饱和湿度培养箱。

传代与冻存：传代比例为1:2-1:3，细胞密度达80%-90%时进行传代；冻存液为90%FBS + 10%DMSO，液氮或-80℃保存。

培养操作

复苏细胞：冻存管37℃水浴快速解冻，加入5mL完全培养基混匀，1000RPM离心5分钟，弃上清，用5mL完全培养基重悬后接种至T25培养瓶，37℃、5%CO₂培养箱培养，第二天换液并检查细胞密度。

细胞传代：

悬浮细胞：收集细胞悬液，1000RPM离心8-10分钟，弃上清，加1-2mL培养液吹匀，按1:2-1:3比例分瓶；或采用半数换液方式，弃半数培养基后分装。

贴壁细胞（如KMM-1 Adherent）：弃去培养上清，PBS清洗1-2次，加入1-2mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于37℃消化1-2min，显微镜下观察细胞变圆并脱落，加入完全培养基终止消化，吹打均匀，离心后按1:2-1:3比例分瓶。

细胞冻存：细胞生长至80%汇合度时，弃培养液，PBS清洗一次，加入消化液消化细胞，离心收集细胞沉淀，去除上清后按冻存数量加入冻存液（如90%FBS + 10%DMSO），直接放入-80℃或液氮罐保存。

注意事项

污染防控：操作全程需严格无菌，定期检测支原体、细菌、真菌污染（细胞检测应不含HIV-1、HBV、HCV等）。

细胞状态监测：复苏后24小时及传代后需镜下观察细胞生长状态和污染情况，确保细胞活力。

其他：运输用灌液培养基不可继续培养，需更换新配制的完全培养基；首次传代建议1:2传代。

基本操作步骤：

原代培养：取材→分离→培养，需保持材料新鲜及严格无菌2。

传代培养：贴壁细胞需胰酶消化，悬浮细胞可直接传代，离心后重悬分瓶23。

冻存与复苏：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后液氮保存；复苏时快速37℃水浴解冻。

具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。

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注意事项与应用：

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。