KHM-1B细胞

产品信息：

KHM-1B细胞是一种人多发性骨髓瘤细胞系，具有贴壁生长特性，常用于科研工作；其培养需使用含10%胎牛血清和1%双抗的RPMI-1640或DMEM基础培养基，在37℃、5% CO₂环境下培养，当细胞密度达到80%-90%时进行传代，传代时需用不含钙镁离子的PBS润洗，再用0.25%胰酶-EDTA消化1-2分钟，随后终止消化、离心重悬并按1:2到1:5比例分瓶。

细胞基本特性

来源与形态：KHM-1B细胞来源于人多发性骨髓瘤组织，属悬浮或贴壁生长型，形态呈淋巴母细胞样或上皮样；部分亚系如KHM-1B/RFP带红色荧光标记。

生长特性：细胞密度达80%-90%时即可进行传代培养，倍增时间约24-30小时；可长期传代维持，理论无限传代能力。

培养条件与操作步骤

基础培养基：推荐使用RPMI-1640或DMEM（高糖）培养基，添加10%胎牛血清（FBS）及1%双抗（青霉素/链霉素），培养环境为37℃、5% CO₂及95%空气，湿度维持70%-80%。

复苏操作：将含1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL完全培养基混合均匀，1000rpm离心5分钟弃上清，补加4-6mL完全培养基重悬，接种至T25培养瓶或6cm皿中培养过夜，次日换液并检查细胞密度。

传代操作：

贴壁细胞：弃培养上清，用不含钙镁离子的PBS润洗1-2次；加1-2mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA消化液，37℃消化1-2min，镜下观察细胞变圆并脱落，轻敲培养瓶加5mL以上含血清完全培养基终止消化；吹打收集细胞悬液，1000rpm离心8-10分钟，弃上清，补加1-2mL培养液重悬，按1:2到1:5比例分至新培养瓶（如两个T25瓶），补充5-8mL/瓶完全培养基。

悬浮细胞：收集细胞悬液，1000rpm离心8-10分钟，弃上清，补加1-2mL培养液重悬，按1:2到1:5比例分瓶；或采用半数换液法，弃半数培养基后重悬细胞并分瓶。

冻存操作：细胞生长至80%面积时，弃培养液，PBS清洗一次；加0.25%胰酶消化液约1mL，镜下观察回缩变圆后加完全培养基终止消化，吹打转移至15mL离心管，1000rpm离心5分钟；沉淀用适量无血清冻存液（如含10%DMSO）重悬，调整细胞密度≥1×10⁶/mL，分装冻存管，程序降温（如-20℃ 1.5h后转入-80℃），24小时后可转入液氮长期保存。

注意事项与售后条款

运输处理：收到细胞后用75%酒精消毒瓶身，超净台内静置2-4小时；若培养瓶盖未松开需拧松；镜下检查污染及脱落细胞，运输中脱落的活细胞可离心富集后传代。

污染防控：严格无菌操作，若培养基浑浊或瓶身破损需立即联系供应商；售后条款包括：污染问题需在48小时内提交台盼蓝染色结果，核实后重发；干冰运输复苏后24小时内多数细胞未存活可重发。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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功能特点

通过被动运输和主动运输实现物质跨膜转运；以ATP为核心载体，通过线粒体氧化磷酸化或叶绿体光合磷酸化途径供能；通过受体-第二信使-效应器的级联反应模式进行信号转导；原核细胞采用二分裂，真核细胞则通过有丝分裂、减数分裂等方式繁殖；细胞可进行程序性死亡（凋亡），并在多细胞生物中实现分化形成不同组织