HROBML03细胞

                                                           HROBML03细胞
产品信息：

HROBML03细胞是一种人成骨细胞系，呈贴壁生长，形态为成骨细胞样，倍增时间约24-30小时，常用于科研。

细胞基本特性

来源与分类：人成骨细胞系，用于科研，不可转让第三方。

生长与形态：贴壁生长；形态为成骨细胞样；密度达80%-90%时可传代。

培养条件：37℃、5% CO₂培养箱，湿度70%-80%；含10%胎牛血清的完全培养基。

培养操作步骤

步骤  方法

复苏  37℃水浴解冻冻存管，加培养基混匀，1000 rpm离心3-5 min，弃上清，重悬于新鲜培养基，转入培养瓶，次日观察。

传代（密度达80%-90%）  贴壁细胞：弃上清，PBS洗，加1-2 mL消化液（0.25% Trypsin-EDTA），37℃消化1-2 min，镜下观察变圆脱落，加完全培养基终止，离心后重悬，按1:2到1:5分瓶。悬浮细胞：收集悬液，离心，重悬，按1:2到1:5分瓶或半数换液。

冻存  生长良好时，弃培养基，加少量胰酶消化，离心收集，去除上清，用无血清冻存液或90% FBS+10% DMSO重悬，分装冻存管，-20℃ 1.5 h后转入-80℃或液氮。

注意事项

运输培养基不可再用，需更换新鲜配制的完全培养基。

收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁，室温静置1 h，显微镜确认状态，拍照留存；贴壁细胞运输中可能脱落，属正常现象，脱落较多时可收集培养液离心，沉淀加胰酶消化后重悬传代。

建议前3代冻存种子细胞。

收到细胞后需立即检查污染、瓶身破损、培养液漏液等，若有问题拍照并与供应商联系；第一次传代建议1:2传代。

细胞类型与特性：

原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。

细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。

细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。

根据生长方式分为：

贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。

悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。

半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。

特殊细胞的生物特性举例：

成纤维细胞：具丰富粗面内质网、高尔基体，能合成胶原纤维、弹性纤维及有机基质；在外伤刺激下可恢复幼稚状态，参与组织修复。

肿瘤细胞：具无限增殖、贴壁依赖或悬浮生长、易转化等特性，常用于药物筛选与癌变机制研究。

神经干细胞：具多向分化潜能（可分化为神经元、星形胶质细胞等），增殖能力强，在体外培养中可形成克隆球。

注意事项与应用：

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。

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