HCT116AKT1/2(-/-)细胞

产品信息：

HCT116AKT1/2(-/-)细胞是一种基因编辑的人结肠癌细胞系，主要用于肿瘤机制研究和药物筛选。该细胞系源自HCT116细胞，通过敲除AKT1和AKT2基因构建，用于研究PI3K/AKT信号通路在结肠癌中的作用机制。

细胞特性

生物学特征：

物种来源：人结肠癌细胞

形态：上皮细胞样，多角状，贴壁生长

基因特征：AKT1/2双基因敲除，保留HCT116原始遗传背景

致瘤性：在裸鼠体内可形成肿瘤，用于癌症机制研究

培养条件：

培养基：推荐使用DMEM或McCoy's 5A培养基，含10%胎牛血清

培养环境：37℃、5% CO2培养箱

传代比例：1:2至1:4，细胞密度达80%-90%时进行传代

消化方法：使用0.25%胰蛋白酶消化液，37℃消化1-2分钟

培养操作步骤

细胞复苏：

37℃水浴快速解冻冻存管，加入5ml完全培养基混匀

1000rpm离心5分钟，弃上清后重悬接种至T25培养瓶

37℃培养箱培养，第二天换液检查细胞密度

细胞传代：

弃去培养上清，PBS润洗1-2次

加入1-2ml 0.25%胰蛋白酶消化液，37℃消化1-2min

显微镜观察细胞变圆脱落时，加入完全培养基终止消化

吹打成单细胞悬液，1000rpm离心5分钟，按1:2比例分瓶

细胞冻存：

细胞生长至80%汇合度时，胰酶消化收集细胞

使用无血清冻存液或90%FBS+10%DMSO，1ml/冻存管

程序降温盒-80℃过夜，24小时后转入液氮罐长期保存

应用注意事项

该细胞系适用于信号通路研究、药物敏感性测试和基因功能验证等领域。培养时需注意定期检测支原体污染，保持细胞遗传稳定性，避免过度融合导致细胞状态改变。由于是基因编辑细胞系，建议定期进行STR鉴定确保细胞身份正确。

具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

公司正在出售的产品：