EVSA-T细胞

                                                           EVSA-T细胞
产品信息：

EVSA-T细胞是一种来源于女性乳腺癌（腹水转移）的人源细胞系，形态为上皮样，生长特性为贴壁生长。

细胞基本信息

EVSA-T细胞的英文名称为EVSA-T，来源于乳腺癌组织，具体为腹水转移样本，供体性别为女性。该细胞系主要用于科研用途，不可用于人类或动物疾病的治疗产品使用。

培养条件

基础培养基：推荐使用DMEM培养基，添加NaHCO₃ 1.5g/L，丙酮酸钠 0.11g/L。

血清添加：添加10%优质胎牛血清（FBS）。

培养环境：37℃培养箱，5% CO₂，95%空气，培养箱湿度保持在70%-80%。

细胞形态和生长特性

EVSA-T细胞呈上皮细胞样形态，为贴壁生长细胞。细胞含量要求>1×10⁶个/mL，支原体、细菌、酵母和真菌检测均为阴性。

培养操作步骤

复苏细胞：

将冻存管在37℃水浴中迅速解冻

加入5mL培养基混合均匀

1000RPM离心5分钟，弃上清

加入4-6mL完全培养基重悬，转入培养瓶中培养过夜5

传代培养（当细胞密度达80%-90%时）：

弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗1-2次

加入1-2mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA），37℃消化1-2分钟

显微镜下观察，细胞大部分变圆并脱落时，加入5mL以上含血清培养基终止消化

轻轻吹打成单细胞悬液，按1:2到1:5比例分瓶

细胞冻存：

收集生长状态良好的细胞

用含血清培养基重悬，血球计数板计数

1000rpm离心5分钟，弃上清

用冻存液（90%完全培养基+10%DMSO）重悬，细胞密度不低于1×10⁶/mL

程序降温后转入-80℃冰箱或液氮保存

注意事项

收到细胞后需先检查细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象

用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态

贴壁细胞需注意传代后细胞放2天不动，避免频繁移动

建议前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于技术沟通

细胞类型与特性：

原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。

细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。

细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。

根据生长方式分为：

贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。

悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。

半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。

特殊细胞的生物特性举例：

成纤维细胞：具丰富粗面内质网、高尔基体，能合成胶原纤维、弹性纤维及有机基质；在外伤刺激下可恢复幼稚状态，参与组织修复。

肿瘤细胞：具无限增殖、贴壁依赖或悬浮生长、易转化等特性，常用于药物筛选与癌变机制研究。

神经干细胞：具多向分化潜能（可分化为神经元、星形胶质细胞等），增殖能力强，在体外培养中可形成克隆球。

注意事项与应用：

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。

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