EFM-19细胞

                                                           EFM-19细胞
产品信息：

EFM-19细胞是人乳腺癌细胞系，来源于50岁女性乳腺癌胸腔积液，呈上皮细胞样形态，贴壁生长，分子特征为ER阳性、PR阳性、HER2阴性（Luminal A亚型），广泛用于乳腺癌机制研究、内分泌治疗及耐药机制探索。

细胞特性

来源与背景：建立于1979年，源自50岁女性乳腺癌患者胸腔积液（ductal type, histological grading II），种属为人源（Homo sapiens）。

形态与生长：上皮细胞样形态，贴壁生长，倍增时间约50-60小时；分子分型为Luminal A亚型（ER+/PR+/HER2-），常用于乳腺癌内分泌治疗机制及药物敏感性研究。

应用领域：涵盖乳腺癌分子机制、内分泌治疗、耐药机制、药物联合应用研究等，是评估抗雌激素药物（如他莫昔芬）的重要模型。

培养条件

培养基与环境：推荐使用RPMI-1640培养基，添加10%-20%胎牛血清（FBS）及1%青霉素-链霉素（P/S），37°C、5% CO₂培养箱中培养。

传代与冻存：传代比例1:2-1:4（首次建议1:2），每周换液2-3次；冻存条件为90%FBS+10%DMSO，液氮长期保存。

复苏与操作：冻存管37℃水浴快速解冻，加入完全培养基离心后重悬，接种于T25培养瓶或6cm培养皿；贴壁细胞用0.25%胰酶-EDTA消化1-2分钟，观察细胞变圆后终止消化，吹打混匀后分瓶。

优点与局限性

优点：作为Luminal A型乳腺癌典型模型，培养稳定性高，实验重复性强，适用于药物筛选、基因检测及耐药模型构建。

局限：单一细胞系不能完全代表乳腺癌异质性，部分实验需注意血清浓度及培养条件优化。

注意事项：收到细胞后需检查瓶体完整性及污染迹象，75%酒精消毒表面后置于37℃培养箱静置2-4小时稳定状态；运输用培养基不可再用，需换新配制完全培养基；首次传代建议保留原瓶培养基对比培养。

基本操作步骤：

原代培养：取材→分离→培养，需保持材料新鲜及严格无菌2。

传代培养：贴壁细胞需胰酶消化，悬浮细胞可直接传代，离心后重悬分瓶23。

冻存与复苏：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后液氮保存；复苏时快速37℃水浴解冻。

具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。

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注意事项与应用：

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。