C2C12,P12(fromGeXinjie)细胞

产品信息：

C2C12 (P12 from GeXinjie) 是一种小鼠成肌细胞系，贴壁生长，培养时需使用 DMEM 培养基添加 10% FBS 和 1% P/S，在 37℃、5% CO₂ 条件下培养，细胞贴壁较弱，消化时间需严格控制。

细胞特性

来源：由 D. Yaffe 和 O. Saxel 建立的小鼠成肌细胞株亚克隆，来源为 C3H 小鼠骨骼肌。

生长特性：贴壁生长，贴附性较弱，易受温度变化或震荡影响而脱落；生长较快，需每日观察密度。

功能特性：在低血清条件下可分化为可收缩的肌管，形成骨骼肌束；可被骨形态发生蛋白 2（BMP-2）诱导转为成骨细胞表型。

培养条件

培养基：DMEM + 10% FBS + 1% P/S；部分来源建议使用 RPMI 1640 替代 DMEM。

培养环境：37℃、5% CO₂ 培养箱，湿度 70%-80%。

传代比例：1:3 至 1:6，推荐播种密度 1×10⁴ cells/cm²；生长至 80%-90% 汇合度时传代。

换液频率：每 2-3 天更换一次培养基。

操作步骤

复苏：液氮取出冻存管，37℃水浴快速解冻（保留少量冰晶），转移至含预热培养基的离心管，1000 rpm 离心 5 分钟，弃上清后重悬接种；复苏后 24 小时观察贴壁情况。

传代：弃旧培养基，PBS 轻柔润洗；加入预热胰酶（如 Accutase 或 0.25% Trypsin-EDTA），37℃消化 30 秒至 2 分钟（显微镜下观察细胞回缩、间隙变大），轻柔吹打终止消化，离心（1000 rpm，5 分钟）后重悬分瓶；传代后建议 24 小时换液去除死细胞。

冻存：对数生长期细胞离心收集，用 90% FBS + 10% DMSO 或无血清冻存液重悬（细胞密度 1×10⁶/mL 以上），程序降温盒逐步降温后转入液氮；冻存 24 小时后建议复苏检测活性。

注意事项

贴壁弱：运输震荡、低温或试剂过冷易导致细胞回缩、脱落，操作时需轻柔，及时放回培养箱静置可恢复。

密度控制：密度过低生长缓慢，过高或长时间高密度培养易受损，建议 80% 汇合度时传代。

背景黑点：培养中少量黑点为代谢产物或碎片，不影响生长；较多时可通过 PBS 润洗或换液清除。

分化控制：培养时血清浓度需保持高（如 10% FBS），避免饥饿状态以防提前分化。

研究应用

肌肉生物学：研究骨骼肌发育、分化、基因表达及肌管形成机制。

药物筛选：评估潜在药物对肌肉代谢、增殖及分化的效应（如胰岛素信号、葡萄糖代谢）。

转染模型：适合作为基因转染宿主，研究肌肉相关蛋白功能。

具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

公司正在出售的产品：