A549人非小细胞肺癌细胞

产品信息：

A549细胞是一种常用的人非小细胞肺癌（NSCLC）细胞系，广泛应用于肺癌相关研究，尤其是在药物筛选、肿瘤生物学及分子机制研究方面。以下是其详细介绍、培养操作和特性：

细胞特性：

来源：A549细胞系于1972年从一名58岁白人男性肺腺癌患者的肿瘤组织中分离建立。

形态：细胞呈上皮样形态，贴壁生长，多角形，具有典型的上皮细胞特征。

生长特性：生长活跃，倍增时间约22小时，常用于研究非小细胞肺癌的增殖、侵袭及药物反应等。

分子特征：角蛋白阳性，携带KRAS G12S突变，无EGFR敏感突变，可分泌癌胚抗原（CEA），表达上皮细胞标志物（如CK18、E-钙粘蛋白）。

培养条件：

培养基：通常使用Ham's F-12K或DMEM/F12培养基，补充10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素/链霉素（P/S）。

培养环境：37℃、5% CO₂培养箱，湿度保持在70%-80%。

传代比例：1:3至1:6，每2-3天传代一次，或当细胞密度达到80%-90%时进行传代。

培养操作步骤：

复苏：

从液氮中取出冻存管，迅速放入37℃水浴中解冻。

将细胞悬液转移至含有预热培养基的离心管中，1000 rpm离心5分钟，弃去上清。

加入新鲜培养基重悬细胞，转移至培养瓶中，37℃培养箱中培养过夜，次日观察细胞状态。

传代：

弃去培养上清，用PBS润洗细胞1-2次。

加入胰酶消化液（0.25% Trypsin-EDTA），37℃消化1-2分钟，镜下观察细胞变圆并脱落时，加入完全培养基终止消化。

轻轻吹打细胞悬液，离心（1000 rpm，5分钟），弃去上清，用新鲜培养基重悬细胞后按1:3-1:6比例分瓶。

冻存：

收集对数生长期细胞，离心后弃上清，用冻存液（含10%DMSO的完全培养基）重悬细胞。

分装至冻存管中，按照标准冻存程序（如程序降温盒或逐步降温法）降至液氮温度后长期保存。

注意事项：

定期检测细胞形态和生长状态，确保细胞未发生污染或变异。

A549细胞系在非小细胞肺癌研究中具有重要价值，特别是在药物筛选、肿瘤生物学及分子机制研究方面。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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功能特点

通过被动运输和主动运输实现物质跨膜转运；以ATP为核心载体，通过线粒体氧化磷酸化或叶绿体光合磷酸化途径供能；通过受体-第二信使-效应器的级联反应模式进行信号转导；原核细胞采用二分裂，真核细胞则通过有丝分裂、减数分裂等方式繁殖；细胞可进行程序性死亡（凋亡），并在多细胞生物中实现分化形成不同组织