RT112/84人膀胱癌细胞

产品信息：

RT112/84人膀胱癌细胞是一种广泛使用的人膀胱癌细胞系，以下是其详细介绍、培养操作和特性：

细胞特性：

来源与背景：RT112细胞系于1973年由Carol Rigby博士建立，源自一位未经治疗的女性膀胱癌患者（组织学分级G2）的肿瘤组织。该细胞系常用于膀胱癌的研究，包括肿瘤发生机制、药物筛选和基因功能研究等。

形态与生长特性：RT112细胞呈上皮细胞样形态，贴壁生长。细胞具有多角形致密形态，细胞边缘光滑，细胞间紧密粘附。

分子标志：表达多种膀胱癌相关标志物，如角蛋白CK7、CK20等。细胞携带TP53、RB1等多个抑癌基因的突变，这些基因缺陷导致细胞周期调控紊乱。

培养条件：

培养基：常用RPMI-1640培养基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素/链霉素（P/S）。

培养环境：37℃、5% CO₂、饱和湿度培养箱。

传代与冻存：细胞密度达到80%-90%时进行传代，常用胰酶消化法。冻存液通常含有90%血清和10%DMSO，细胞可在液氮中长期保存。

培养操作：

复苏细胞：

将冻存管在37℃水浴中迅速解冻，转移至含有5-6 mL完全培养基的离心管中，1000 rpm离心5分钟，弃去上清液。

用新鲜培养基重悬细胞，接种至培养瓶中，37℃培养过夜。

细胞传代：

弃去旧培养基，用PBS润洗细胞后加入胰酶（0.25% Trypsin-EDTA），37℃孵育至细胞脱落（通常2-3分钟）。

加入含血清的完全培养基终止胰酶作用，轻轻吹打使细胞分散。

离心收集细胞，用新鲜培养基重悬后按适当比例分装至新的培养瓶中。

冻存细胞：

收集对数生长期的细胞，离心后弃去上清液，用冻存液重悬细胞。

分装至冻存管中，按照标准程序逐步降温后存放于液氮罐中。

注意事项：

细胞状态监测：定期观察细胞形态和生长状态，确保细胞健康。

污染防控：操作全程需严格无菌，定期检测支原体、细菌、真菌污染。

RT112/84细胞在膀胱癌研究中具有重要应用价值，可用于研究肿瘤发生机制、药物筛选和基因功能研究等。通过规范的培养操作，可以确保细胞的正常生长和实验的可靠性。

具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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