正常人结肠上皮细胞；FHC (STR)

产品信息：

FHC细胞是一种人正常结肠上皮细胞系，常用于结肠相关研究，尤其是在结肠癌病因学和肠道生理机制研究中具有重要价值。以下是关于FHC细胞的详细介绍、培养操作及其特性：

细胞特性：

来源：FHC细胞系由K.M. Siddiqui和D.P. Chopra于1984年建立，源自13-17孕周流产胎儿的结肠粘膜组织。

形态：细胞呈上皮细胞样，贴壁生长，具有多边形致密形态，细胞边缘光滑，细胞间紧密粘附。

分子标志：表达细胞角蛋白18、20（CK18、CK20）及肠碱性磷酸酶（IAP），形成具有紧密连接和微绒毛的上皮单层。

生长特性：倍增时间约为62小时，具有正常的结肠上皮细胞功能，如粘多糖合成和紧密连接形成。

培养条件：

培养基：推荐使用DMEM/F12培养基，添加10%胎牛血清（FBS）、10 ng/mL霍乱毒素、0.005 mg/mL胰岛素、0.005 mg/mL转铁蛋白、100 ng/mL氢化可的松和20 ng/mL人重组表皮生长因子（EGF）。

培养环境：37℃、5% CO₂、饱和湿度培养箱。

传代比例：1:2 至 1:3，当细胞密度达到 70%-80% 时进行传代。

冻存条件：使用含有 90% 血清和 10% DMSO 的冻存液，液氮长期保存。

培养操作：

复苏细胞：

将冻存管在 37℃ 水浴中迅速解冻，转移至含有 5-6 mL 预热完全培养基的离心管中，1000 rpm 离心 5 分钟，弃去上清液。

用新鲜培养基重悬细胞，接种至培养瓶中，37℃ 培养过夜。

细胞传代：

弃去旧培养基，用 PBS 润洗细胞后加入胰酶（0.25% Trypsin-EDTA），37℃ 孵育至细胞脱落（通常 2-3 分钟）。

加入含血清的完全培养基终止胰酶作用，轻轻吹打使细胞分散。

离心收集细胞，用新鲜培养基重悬后按适当比例分装至新的培养瓶中。

冻存细胞：

收集对数生长期的细胞，离心后弃去上清液，用冻存液重悬细胞。

分装至冻存管中，按照标准程序逐步降温后存放于液氮罐中。

注意事项：

FHC细胞对胰酶敏感，消化时间需严格控制，避免过度消化导致细胞损伤。

细胞生长较缓慢，需定期观察细胞状态，及时调整培养条件。

FHC细胞作为一种人正常结肠上皮细胞系，在结肠生理和病理研究中具有重要应用价值。通过规范的培养操作，可以确保细胞的正常生长和实验的可靠性。

具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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