人胚胎眼巩膜成纤维细胞系；HFSF (STR)

产品信息：

人胚胎眼巩膜成纤维细胞系HFSF是由北京眼科研究所建立的正常组织细胞系，来源于胚胎眼巩膜组织，具有成纤维细胞样形态和贴壁生长特性，主要用于科学研究领域的巩膜相关疾病模型构建和眼部组织生理功能研究。

细胞基本特性

形态与生长：HFSF细胞呈现典型的成纤维细胞样纺锤状形态，贴壁生长特性稳定，非肿瘤源性。部分资料显示该细胞系也可能表现为疏松贴壁或形成漂浮细胞簇。

培养条件：基础培养基为高糖DMEM（DMEM-H），需添加10%-20%胎牛血清（FBS）及1%双抗（青霉素-链霉素），培养环境要求37℃恒温、5% CO₂、饱和湿度。建议使用无血清冻存液进行液氮保存。

培养操作规范

复苏细胞：将冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4-5mL培养基混合均匀，在1000rpm条件下离心3-5分钟，弃去上清液后补加1-2mL培养基吹匀，将细胞悬液加入T25培养瓶或6cm皿中培养过夜。

细胞传代：当细胞密度达到80%-90%时进行传代。弃去培养上清，用不含钙镁离子的PBS润洗1-2次，加入0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA消化液1ml，37℃培养箱消化1-3分钟，在显微镜下观察细胞消化情况，待细胞大部分变圆并脱落时加入完全培养基终止消化，轻轻打匀后按1:2至1:4比例分瓶。

细胞冻存：收集生长状态良好的细胞，用PBS清洗一遍，计数后加入无血清细胞冻存液（90%胎牛血清+10% DMSO），使细胞密度达到5×10⁶～1×10⁷/mL，每支冻存管保存1mL细胞悬液，放入-80℃冰箱24小时后转入液氮灌储存。

质量控制与鉴定

STR鉴定：该细胞系通过STR位点鉴定确认遗传背景，特征性位点包括Amelogenin：X，Y；CSF1PO：10，12；D13S317：10，11；D16S539：9，13；D18S51：17，18；D19S433：13，14；D21S11：31，32.2；D2S1338：18，19；D3S1358：15；D5S818：10，12；D7S820：11；D8S1179：10，16；FGA：18，22；TH01：7，10；TPOX：8；vWA：。

质量控制：细胞活性需达到95%以上，支原体检测为阴性，无细菌、病毒及真菌污染。表面标志物检测显示CD29、CD44、CD105阳性，CD34、CD45阴性。

科研应用与注意事项

应用范围：主要用于巩膜组织再生研究、病理性近视模型构建，以及细胞外基质分泌规律和胶原代谢调控机制的研究。

操作要点：收到细胞后应首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，用75%酒精擦拭消毒后置于37℃培养箱放置2-4小时稳定细胞状态。培养过程中需严格遵守无菌操作规范，避免细胞污染和交叉污染。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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功能特点

通过被动运输和主动运输实现物质跨膜转运；以ATP为核心载体，通过线粒体氧化磷酸化或叶绿体光合磷酸化途径供能；通过受体-第二信使-效应器的级联反应模式进行信号转导；原核细胞采用二分裂，真核细胞则通过有丝分裂、减数分裂等方式繁殖；细胞可进行程序性死亡（凋亡），并在多细胞生物中实现分化形成不同组织