NCI-H23人非小细胞肺癌细胞 新品

产品信息：

NCI-H23是一种人非小细胞肺癌（NSCLC）细胞系，常用于肺癌研究，特别是药物筛选、信号通路研究和基因功能研究。以下是关于NCI-H23细胞的详细介绍、培养操作及其特性：

细胞特性：

来源：NCI-H23细胞系源自一位51岁黑人男性非小细胞肺癌患者的肺腺癌组织，该样本在患者接受治疗前获取，保留了原发性肿瘤的特征。

形态与生长：细胞呈上皮细胞样形态，贴壁生长。

分子特征：该细胞系表达多种癌基因（如C-myc、Ha-ras）并携带K-ras基因第12密码子突变及p53基因突变（246位密码子，ATC→ATG），这些突变与其肿瘤特性密切相关。

应用领域：广泛用于非小细胞肺癌研究，包括药物筛选、信号转导、基因功能及肿瘤微环境研究等。

培养条件：

培养基：通常使用RPMI-1640培养基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%双抗（青霉素/链霉素）。

气体环境：95%空气 + 5% CO₂。

温度：37℃。

传代比例：推荐1:2至1:3的比例进行传代，每2-3天传代一次。

培养操作：

复苏细胞：

从液氮中取出冻存管，迅速在37℃水浴中解冻。

将细胞悬液转移至含有5-6 mL完全培养基的离心管中，1000 rpm离心5分钟，弃去上清液。

用新鲜培养基重悬细胞，将细胞悬液加入培养瓶中，37℃培养过夜。

细胞传代：

当细胞密度达到80%-90%时进行传代。

弃去旧培养基，用PBS润洗细胞1-2次。

加入消化液（0.25% Trypsin-0.53 mM EDTA），37℃消化1-2分钟，镜下观察细胞变圆并脱落。

加入完全培养基终止消化，轻轻吹打细胞使其完全脱落。

1000 rpm离心5分钟，弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞。

按适当比例分装至新的培养瓶中，补充新鲜培养基。

冻存细胞：

收集对数生长期的细胞，1000 rpm离心5分钟，弃去上清液。

用冻存液（90% FBS + 10% DMSO）重悬细胞。

将细胞悬液分装至冻存管中，程序降温后转入液氮或-80℃保存。

优点：

研究价值：NCI-H23细胞系保留了原发性非小细胞肺癌的特征，是研究肺癌机制、药物反应及基因功能的重要模型。

生长特性：贴壁生长的特性便于观察和操作，适合多种实验需求。

具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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