MIA PaCa-2人胰腺导管腺癌细胞

产品信息：

MIA PaCa-2细胞是一种人胰腺导管腺癌细胞系，广泛用于胰腺癌研究，包括肿瘤生物学、药物筛选和信号转导机制等。以下是关于MIA PaCa-2细胞的详细介绍、培养操作及其特性：

细胞特性：

来源：MIA PaCa-2细胞系于1975年由A. Yunis等人从一名65岁高加索男性胰腺癌患者的肿瘤组织中分离建立。

形态：细胞呈上皮细胞样，半贴壁生长，伴有圆形漂浮细胞。

分子特征：该细胞系具有KRAS(G12C)、TP53(R248W)和CDKN2A/p16缺失等典型基因突变，表达细胞角蛋白5.6、E-钙粘蛋白、波形蛋白等标志物，具有较高的转移潜能。

应用：MIA PaCa-2细胞广泛应用于胰腺癌研究，包括药物筛选、信号通路研究、耐药机制和转移机制等。

培养条件：

培养基：推荐使用DMEM高糖培养基，添加10%胎牛血清（FBS）、2.5%马血清和1%青霉素/链霉素（P/S）。

培养环境：37℃、5% CO₂、饱和湿度培养箱。

传代比例：1:2 至 1:6，当细胞密度达到 70%-90% 时进行传代。

冻存条件：使用含有 55% 基础培养基、40% FBS 和 5% DMSO 的冻存液，液氮长期保存。

培养操作：

复苏细胞：

将冻存管在 37℃ 水浴中迅速解冻，转移至含有 5-6 mL 预热完全培养基的离心管中，1000 rpm 离心 5 分钟，弃去上清液。

用新鲜培养基重悬细胞，接种至培养瓶中，37℃ 培养过夜。

细胞传代：

弃去旧培养基，用 PBS 润洗细胞后加入胰酶（0.25% Trypsin-EDTA），37℃ 孵育至细胞脱落（通常 1-2 分钟）。

加入含血清的完全培养基终止胰酶作用，轻轻吹打使细胞分散。

离心收集细胞，用新鲜培养基重悬后按适当比例分装至新的培养瓶中。

冻存细胞：

收集对数生长期的细胞，离心后弃去上清液，用冻存液重悬细胞。

分装至冻存管中，按照标准程序逐步降温后存放于液氮罐中。

注意事项：

MIA PaCa-2细胞为半贴壁半悬浮细胞，传代时需注意收集悬浮细胞，避免浪费。

细胞对胰酶敏感，消化时间需严格控制，避免过度消化导致细胞损伤。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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功能特点

通过被动运输和主动运输实现物质跨膜转运；以ATP为核心载体，通过线粒体氧化磷酸化或叶绿体光合磷酸化途径供能；通过受体-第二信使-效应器的级联反应模式进行信号转导；原核细胞采用二分裂，真核细胞则通过有丝分裂、减数分裂等方式繁殖；细胞可进行程序性死亡（凋亡），并在多细胞生物中实现分化形成不同组织