A-375人黑素瘤细胞

产品信息：

A-375细胞是一种人恶性黑色素瘤细胞系，广泛用于癌症研究，特别是在黑色素瘤的机制研究、药物筛选和信号通路分析中。以下是关于A-375细胞的详细说明、培养操作和特性：

细胞说明：

来源与背景：A-375细胞系源自一位54岁女性患者的恶性黑色素瘤组织，由D. J. Giard等人建立。这些细胞具有无色素黑色素瘤的特征，并且能够在免疫抑制小鼠中形成类似于恶性黑色素瘤的皮下肿瘤。

分子特征：A-375细胞是NRAS突变体，常用于研究NRAS信号通路在黑色素瘤中的作用。此外，这些细胞表达多种黑色素瘤相关标志物，如Melan-A、Tyrosinase等。

应用领域：A-375细胞广泛用于黑色素瘤的研究，包括肿瘤生物学、药物筛选、基因表达分析和信号转导研究。

培养操作：

培养基：推荐使用DMEM培养基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素/链霉素（P/S）。

培养环境：37℃、5% CO₂培养箱，湿度饱和。

传代方法：当细胞密度达到80%-90%时进行传代。使用0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA消化细胞，消化时间约为1-2分钟。离心收集细胞后，用新鲜培养基重悬，按1:2至1:4的比例分瓶。

冻存与复苏：冻存液通常为90% FBS + _k2>10% DMSO。复苏时，将冻存管迅速放入37℃水浴中解冻，然后将细胞悬液转移至含有新鲜培养基的离心管中，离心后弃去上清，用培养基重悬细胞，接种到培养瓶中。

细胞特性：

生长特性：A-375细胞呈贴壁生长，形态为上皮细胞样，表现为多边形或纺锤形。

倍增时间：细胞倍增时间约为24-32小时。

注意事项：A-375细胞在培养过程中可能会出现黑点，这通常是细胞碎片或死亡细胞，属于正常现象，无需特殊处理。

A-375细胞系作为一种经典的人恶性黑色素瘤模型，在研究黑色素瘤的分子机制、药物筛选和信号通路调控等方面具有重要的科学价值。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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功能特点

通过被动运输和主动运输实现物质跨膜转运；以ATP为核心载体，通过线粒体氧化磷酸化或叶绿体光合磷酸化途径供能；通过受体-第二信使-效应器的级联反应模式进行信号转导；原核细胞采用二分裂，真核细胞则通过有丝分裂、减数分裂等方式繁殖；细胞可进行程序性死亡（凋亡），并在多细胞生物中实现分化形成不同组织