C-33A人子宫癌细胞

产品信息：

C-33A细胞是一种人子宫颈癌细胞系，常用于癌症研究，

细胞说明：

来源与背景：C-33A细胞系最初由N. Auersperg从一名66岁的白人子宫颈鳞状细胞癌患者的宫颈组织中分离建立。这些细胞最初表现出亚二倍体核型和上皮细胞形态，但随着连续传代，核型变得不稳定。

分子特征：C-33A细胞表达视网膜母细胞瘤蛋白（pRB），但其大小异常。p53基因表达上调，并且在密码子273处存在点突变，导致氨基酸由精氨酸（Arg）替换为半胱氨酸（Cys）。此外，C-33A细胞对人乳头瘤病毒（HPV）DNA和RNA呈阴性。

应用领域：C-33A细胞广泛用于宫颈癌研究，特别是在研究肿瘤转移、药物敏感性、基因表达和信号通路等方面。

培养操作：

培养基：推荐使用MEM或DMEM培养基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素/链霉素（P/S）。

培养环境：37℃、5% CO₂培养箱，湿度饱和。

传代方法：当细胞密度达到80%-90%时进行传代。使用0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA消化细胞，消化时间约为1-2分钟。离心收集细胞后，用新鲜培养基重悬，按1:2至1:4的比例分瓶。

冻存与复苏：冻存液通常为90% FBS + 10% DMSO。复苏时，将冻存管迅速放入37℃水浴中解冻，然后将细胞悬液转移至含有新鲜培养基的离心管中，离心后弃去上清，用培养基重悬细胞，接种到培养瓶中。

细胞特性：

生长特性：C-33A细胞呈贴壁生长，形态为上皮细胞样，表现为多边形或纺锤形。

倍增时间：细胞倍增时间约为32-48小时。

注意事项：C-33A细胞对胰蛋白酶消化较为敏感，消化时间需严格控制，避免过度消化导致细胞损伤。

具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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