HK-2 人近端肾小管细胞，正常细胞

产品信息：

HK-2细胞是一种来源于人正常肾近曲小管上皮的永生化细胞系，广泛用于肾脏疾病研究、药物毒理筛选及肾小管功能机制探索。

以下是其详细介绍、培养操作及特性：

细胞特性：

来源与背景：HK-2细胞于1994年由Ryan等通过将人乳头瘤病毒（HPV-16）的E6/E7基因转染至正常成人肾近曲小管上皮细胞，获得永生化的人肾小管上皮细胞系。

功能特性：保留了近端肾小管上皮细胞的多种功能特征，如表达碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转肽酶等标志物，并具有Na⁺依赖性糖转运和对甲状旁腺激素的响应能力。

培养条件：

培养基：推荐使用DMEM/F12培养基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素/链霉素（P/S）

培养环境：37℃、5% CO₂、饱和湿度培养箱。

传代比例：1:2 至 1:4，当细胞密度达到 80%-90% 时进行传代。

冻存条件：使用含有 90% 血清和 10% DMSO 的冻存液。

培养操作：

复苏细胞：

将冻存管在 37℃ 水浴中迅速解冻，转移至含有 5-6 mL 完全培养基的离心管中，1000 rpm 离心 5 分钟，弃去上清液。

用新鲜培养基重悬细胞，接种至培养瓶中，37℃ 培养过夜。

细胞传代：

弃去旧培养基，用 PBS 润洗细胞后加入胰酶（0.25% Trypsin-EDTA），37℃ 孵育至细胞脱落（通常 2-3 分钟）。

加入含血清的完全培养基终止胰酶作用，轻轻吹打使细胞分散。

离心收集细胞，用新鲜培养基重悬后按适当比例分装至新的培养瓶中。

冻存细胞：

收集对数生长期的细胞，离心后弃去上清液，用冻存液重悬细胞。

分装至冻存管中，按照标准程序逐步降温后存放于液氮罐中。

优点：

研究价值：HK-2 细胞保留了近端肾小管上皮细胞的多种功能特性，是研究肾脏生理和病理机制的重要工具。

广泛应用：适用于药物毒理筛选、肾损伤模型构建及信号通路研究等多种实验需求。

缺点：

培养难度：细胞贴壁较慢且对培养条件敏感，需严格控制血清质量和培养基成分。

生长速度：细胞生长速度较慢，尤其是在传代密度较低时，可能影响实验进度。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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功能特点

通过被动运输和主动运输实现物质跨膜转运；以ATP为核心载体，通过线粒体氧化磷酸化或叶绿体光合磷酸化途径供能；通过受体-第二信使-效应器的级联反应模式进行信号转导；原核细胞采用二分裂，真核细胞则通过有丝分裂、减数分裂等方式繁殖；细胞可进行程序性死亡（凋亡），并在多细胞生物中实现分化形成不同组织