Kasumi-2儿童急性B淋巴细胞白血病细胞

                                                           Kasumi-2儿童急性B淋巴细胞白血病细胞
产品信息：

Kasumi-2是一种源自儿童B系急性淋巴细胞白血病（B-ALL）的细胞系，由日本研究者于1990年从一名2岁男性患儿的外周血中分离建立。该细胞系具有t(8;14)(q11;q32)染色体易位，导致MYC-IGH基因融合，驱动细胞异常增殖，属于前B细胞表型（CD19+、CD10+），可用于研究B-ALL的发病机制、耐药性及靶向治疗。

细胞特性

种属来源：人（男性，15岁）

组织来源：骨髓（原代样本来自外周血）

免疫表型：CD19+、CD10+、CD22+、TdT+

染色体异常：t(8;14)(q11;q32)（MYC-IGH融合基因）

培养条件与操作

培养基：90% RPMI 1640 + 10% h.i. FBS（可添加1%青霉素/链霉素或55 μM β-巯基乙醇）

培养环境：37°C、5% CO₂，定期摇晃防止细胞聚团

培养操作步骤

复苏与传代：

冻存管细胞：37°C水浴快速解冻，离心（150 g，5分钟）去除上清，重悬于预热培养基，接种至新培养瓶。

悬浮细胞：离心收集（1000 rpm，5分钟），按1:2～1:4比例稀释至新鲜培养基（密度2-5×10⁵ cells/mL）。

传代频率：细胞密度达80%-90%时传代，每2-3天传1代。

冻存条件：90% FBS + 10% DMSO，-80°C或液氮保存。

应用与注意事项

研究应用：

B-ALL发病机制（如MYC-IGH融合基因功能）

药物筛选（甲氨蝶呤、长春新碱敏感性测试）

免疫治疗模型（CD19-CAR-T细胞或双特异性抗体疗效评估）

污染防控：收到细胞后需立即检查污染（显微镜观察浑浊或细菌），脱落细胞可离心富集后使用。

基本操作步骤：

原代培养：取材→分离→培养，需保持材料新鲜及严格无菌2。

传代培养：贴壁细胞需胰酶消化，悬浮细胞可直接传代，离心后重悬分瓶23。

冻存与复苏：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后液氮保存；复苏时快速37℃水浴解冻。

具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。

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注意事项与应用：

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。