HCC-1195人非小细胞肺癌细胞

HCC-1195人非小细胞肺癌细胞

商品属性：

细胞类型： 人非小细胞肺癌细胞 (Human Non-Small Cell Lung Cancer Cell Line)

组织来源： 肺癌 (Lung Cancer)

种属： 人 (Human)

供体信息： 男性 (Male), 64岁。该细胞系从一名被诊断为非小细胞肺癌患者的恶性胸腔积液（恶性胸水）中分离建立。

生长特性： 贴壁细胞 (Adherent Cells)，在培养中可能观察到少量悬浮细胞或呈类聚集体生长。

培养条件

基础培养基： RPMI-1640 (Roswell Park Memorial Institute 1640 Medium)

注意： 也有供应商提供在改良的DMEM或其它类似培养基中优化的版本，务必使用供应商推荐的特定培养基。标准通用情况下是RPMI-1640。

血清添加： 通常需要补充 10% Fetal Bovine Serum (FBS) (胎牛血清) 或同等质量的牛血清。供应商可能指定其推荐血清的来源和要求。

添加剂: 通常不需要额外添加生长因子或特殊添加剂（如胰岛素、氢化可的松等），基础培养基+10% FBS已足够。

培养环境：

温度： 37°C

CO2浓度： 5%

湿度： 95%以上（饱和湿度）

传代

传代比例： 建议比例在 1:3 到 1:6 之间 (即按1瓶分种成3-6瓶)。具体比例取决于细胞状态和密度。避免过度稀释。

消化方法： 使用 0.25% Trypsin-EDTA 溶液。消化时间通常为室温或37°C下 2-5分钟。密切显微镜下观察，细胞变圆并开始脱壁即可终止消化（加入含血清培养基或胰酶抑制剂）。

传代频率： 当细胞融合度达到 80%-90% 时进行传代。密度过低可能导致生长缓慢或不生长。通常每周需要传代 1-2次。

冻存 (Cryopreservation)：

冻存培养基: 常规含 10% DMSO (二甲基亚砜) 和 90% FBS (或供应商推荐的特定细胞冻存液)。

冻存密度： 建议密度在 5×10⁵ 至 1×10⁶ cells/mL 的浓度范围。

冻存程序： 使用程序性降温盒（例如 Nalgene Mr. Frosty）或程控降温仪，以接近 1°C/分钟 的速度降至 -80°C，然后尽快转移至 液氮气相(-150°C 至 -196°C) 中长期保存。避免在-80°C储存过久。

复苏 (Thawing)：

将冻存管迅速放入 37°C 水浴中，轻轻摇晃直至冰块刚刚融化（约 1-2分钟），切忌长时间水浴。

立即将细胞悬液转移至含有预热的完全培养基的离心管中（例如：1mL冻存细胞液加入9mL完全培养基），轻轻混匀。

离心：200-300g, 5-7分钟。

弃上清，用新鲜完全培养基轻柔重悬细胞沉淀。

将细胞悬液接种到培养瓶中，补充足够的新鲜培养基。

建议在复苏后24小时内更换一次培养基，以去除残留的DMSO和死细胞碎片。

应用：

非小细胞肺癌 (NSCLC) 生物学研究

肿瘤发生、侵袭、转移机制研究

抗癌药物筛选和药效学评估（化疗、靶向、免疫治疗）

肿瘤细胞信号通路研究

分子生物学研究（基因表达、突变分析）
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