PK-15 猪肾细胞 新品

PK-15 猪肾细胞

商品属性：

细胞特性：

1） 来源：猪肾

2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长

3） 含量：>1x10^6  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途：仅供科研使用。

运输和保存：

干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染。

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

注意事项：

PK-15细胞具有一些独特的生物学特性，需要特别注意：

‌贴壁较强‌：细胞贴壁略偏强，消化时易出现消化时间偏长现象，注意一定要消化到细胞可以轻轻吹下，再加终止液终止消化‌。

‌颗粒较多‌：PK-15培养过程中代谢会产生较多颗粒物，细胞内部及细胞周边可以明显看到很多颗粒，此为该细胞正常现象，并不代表细胞状态不佳或污染‌。
如果颗粒过多，可以收集细胞后低速离心并用PBS重悬后再低速离心，重复1-2次后再接种到新的培养瓶中‌。

‌消耗培养基快‌：细胞培养基消耗速度偏快，必须多加点培养基培养细胞，T25瓶加10-12ml完全培养基，10cm皿加12-15ml，2-3天换液一次‌。

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培养实验报告：

一、实验目的

本实验旨在掌握PK-15猪肾细胞的标准培养流程，包括细胞复苏、传代与冻存操作，并观察其生长特性及代谢特点，为后续病毒增殖研究提供基础细胞模型。

二、材料与方法

1. 细胞与试剂

细胞来源：PK-15猪肾细胞（ATCC标准株，STR鉴定合格）

培养基：90% DMEM + 10%胎牛血清（FBS）

关键试剂：0.25%胰酶-EDTA、DMSO、PBS缓冲液

2. 实验步骤

（1）细胞复苏

将冻存管从液氮中取出，37℃水浴快速解冻（1-2分钟）

离心（1000 rpm，5分钟）弃上清，用预温培养基重悬

接种至T25培养瓶，37℃、5% CO₂培养箱静置过夜，次日换液观察密度

（2）细胞传代

当细胞密度达80%-90%时，PBS润洗1-2次

加入0.25%胰酶消化（1-2分钟），显微镜下观察细胞变圆脱落

含血清培养基终止消化，离心后按1:2至1:4比例分装至新培养瓶

（3）细胞冻存

取对数生长期细胞，胰酶消化后离心

冻存液配方：90%完全培养基 + 10% DMSO

程序降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 1小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存